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于长青张日俊
摘要随着寡肽吸收理论的建立,
大豆肽以其独特的生物学功能,在
食品、医药、化妆品等领
域得到了广泛的应用,近年来也逐渐成为动物
营养领域研究的热点。本文综述了大豆肽的理化特性、
饲料中可应用的几个功能、制备方法及在畜牧业中的应用前景。
关键词 大豆肽;饲料添加剂
中图分类号$816.7
许多年来在动物饲养和饲料中广泛使用抗生
素、化学合成药物、激素、B一兴奋剂、重金属、镇静剂
等促生长保健剂.导致了畜禽和水产品中药物残留
严重、畜禽产品品质下降、细菌耐药性增强、耐药菌
株增多,给人类安全和生态环境带来很大威胁。由于
抗生素的诸多副作用。特别是近年来消费者对食品
安全问题的关注。世界各国都在纷纷禁用或限制抗
生素的使用,并加速开发、推广新型安全高效的绿色
饲料添加剂,以减少或替代抗生素等药物添加剂。大
豆肽是大豆蛋白质的水解产物。平均肽链长度为2一
l0的短肽(以2~3的低分子肽为主)还含有少量的游
离氨基酸、糖类和无机盐成分【--。与大豆蛋白相比.大
豆肽具有易消化吸收、抗疲劳、降血压、降胆固醇、调
节胰岛素分泌和脂肪代谢、促进矿物质吸收、刺激微
生物生长和低过敏原性等特性闭。如果进一步降低大
豆肽的
生产成本。将其制成安全、高效的饲料添加
剂,将在动物生产中发挥出不可替代的作用。
★ 国家“863”资助项目(2001AA246111)
于长青,
中国农业大学饲料生物
技术实验室.
北京海淀区圆明园西路2号。
张日俊,单位及通讯地址同第一作者。
收稿日期:2004—10—26
1 国内外研究概况与水平
国际上对大豆肽的研究始于20世纪70年代.其
中美国和
日本都处于发展大豆肽生产和利用的前列。
美国在20世纪70年代取得研究成果.Deitown
Speciaties公司建成了年产5 O00t食用蛋白肽的工
厂。日本也于20世纪80年代开始开展该方面的研
究。雪印和森永等乳业公司均已成功地将大豆肽应用
于食品工业。我国在大豆肽的研究开发上起步较晚,
基础和应用研究都很薄弱.但近几年研究逐步活跃起
来.如使用复合酶多级定向酶切系统技术生产大豆肽
达到了一定水平,同时掌握了大豆肽的性能指标测定、
检测方法以及功能评价等技术:已经投资建设的5 O00t
大豆多功能肽生产线也已试车成功。这些标志着我国
大豆肽产业步入新的发展阶段。为我国跻身大豆肽生
产国际先进行列奠定了坚实的基础。
目前国内外大豆肽主要应用于食品、保健品、医
药、化妆品等行业,在畜牧业中的应用刚刚崭露头角。
2 大豆肽的理化特性
大豆肽的理化性质直接影响其营养特性、加工
特性、应用范围和生物活性。其具体理化性质与分子
100094, 大小或水解度、所用蛋白酶的作用特性、水解条件及
终产物的其它组成成分有密切关系。但总体来说.有
几大共同理化性质[41
2.1 溶解性
维普资讯
http://www.cqvip.com大豆肽不同于大豆蛋白的最重要的理化性质之
一
,即是其良好的溶解性。大豆肽在广谱的pH值、温
度、离子强度、氮浓度范围内都是可溶的,这就极大
地扩大了大豆肽的应用范围。尤其是大豆肽在大豆
蛋白的等电点pH4.3附近保持溶解状态,这一酸溶
特性为开发酸性大豆饮料和食品提供了条件。
2.2 粘度
大豆蛋白质的粘度随着浓度的增高而急剧升
高.在溶液浓度为10%时几乎没有流动性,这是因
为大豆蛋白经高温处理易于产生疏水键和二硫键
结合形成网状聚合物。使得大豆蛋白溶液的粘度高
达9 O00cP。而大豆肽的溶解度可达99%以上,其溶
液的粘度在其浓度高达65%以上时也只有2 20ocP,
具有良好的流动性。而且肽溶液的粘度通常不受热
处理的影响.加热也不会胶凝。
2.3 乳化性
大豆蛋白经酶水解后使包埋于蛋白质内部的
疏水性残基暴露出来。形成了内聚性膜。疏水性残
基与油相互作用。而亲水性残基与水相互作用使得
大豆肽有较好的乳化性。但过度的水解也会导致水
解产物乳化性的急剧下降。这是因为尽管小肽能迅
速扩散,并在界面吸附,但它们不能折叠成在界面
如同蛋白质一样的取向。因此不能有效地降低界面
张力,且小肽能被界面吸附趋势更大的大分子肽取
代,所以小肽分子的乳化稳定性较差。一般来说。肽
链长度应至少大于20个氨基酸残基。才能具有良
好的乳化性。
2.4 同渗重摩
同渗重摩,是指在lkg溶剂中所溶解的有渗透
作用的微粒的量。高同渗重摩溶液。即高压或高渗透
压产品,其会从小肠中吸取大量水分,引起严重腹
泻,甚至脱水和破坏电解质平衡,也会引起恶心、呕
吐和腹胀。5%氨基酸混合物水溶液的渗透压为
422mOsm/kg,而5%大豆肽水溶液的渗透压仅有
213mOsm/kg。对于同渗重摩,游离氨基酸>肽>蛋白
质,因此,肽对氨基酸的取代,必会极大降低最终产
物的渗透压及减少引发不适症的可能性。
3 大豆肽的功能及其在畜牧业中的应用
3.1 大豆肽具有强的抗氧化作用,作为天然防腐剂.
提高饲料品质
ChenHuaming等从大豆蛋白的酶解液中分离到
6种具有抗氧化功能的多肽,其中分子量最小仅是一
个5~(Leu-Leu⋯Pro His His)。发现此类多肽具有一
个共同的特点,即含有较多的组氨酸和酪氨酸。于是
以含有两个组氨酸的小肽为基础,合成了其它28个
多肽,并研究了其抗氧化性能,发现PHH和LHH具
有很强的抗氧化性能[5]。他们指出:抗氧化性多肽片
断是由5~16个氨基酸残基组成,相对分子
质量在
6OO~1 700范围内。可在体外抑制被铁、血红蛋白、脂
质氧化酶和单态氧催化的脂质氧化作用。这些肽还
可通过与PPO催化的醌式产物反应而减少食物褐
变.防止聚合氧化产物的生成。另外,某些肽具有重
金属清道夫和过氧化氢分解促进剂的作用,能降低
自氧化速率。减少脂肪过氧化氢含量,减少自由基的
生成.因而在动物饲料中可作为天然防氧化酸败的
防腐剂。
3.2 大豆肽有调节脂肪代谢的功能,可作为胴体品
质的改善剂
大豆肽不仅能阻碍脂肪的吸收,还具有更强的
促进脂质代谢的效果。日本学者小松卡夫等人在治
疗儿童肥胖过程中发现,大豆肽比牛乳更能提高基
础代谢水平,食后发热量增加,促进能量代谢,并且
可促进皮下脂肪减少。大豆肽能有效减少体脂肪,同
时保持骨骼肌重量不变【6]。高长城等报道,给小白鼠
饲喂大豆肽时发现.能刺激产生热能的褐色脂肪组
织BAT活性。提高甲状腺在血液中的浓度.并随大豆
肽服用量的增加而提高[7]。Hosono等(1994)报道.在
猪日粮中加人0.5%的大豆蛋白水解物.可明显增加
瘦肉率,减少猪胴体脂肪含量,从而提高猪肉品质[8]。
3.3 大豆肽作为矿物元素的载体或螯合剂.提高肌
体对矿物质元素的利用率
大豆肽能够促进矿物元素的吸收.从而促进骨
骼生长、提高蛋壳品质、减少禽类腿病和骨质疏松症
的发生。有研究认为,由于大豆蛋白中植酸、草酸、纤
维、单宁及别的多酚等的存在。显著抑制了动物或人
对Ca[93,Zn、Cu、Mg cm],Fe c“ 的生物利用。而小分子的
肽可以与上述离子形成螯合物,保证其可溶状态。有
利于肌体的吸收。
3.4 作为禽蛋品质改善剂,有助于类胡萝卜素在蛋
黄中的沉积
中国农业大学饲料生物技术室在对60周龄的
海南灰蛋鸡试验中发现,大豆肽饲料添加剂可以使
蛋黄色度提高41.94%,且蛋黄呈金黄红色。质地松
软,味道浓厚,口感非常好。农业部食品检测中心测
定了饲料和鸡蛋中的类胡萝卜素含量。在空白对照
组的蛋黄中,类胡萝卜素的含量为13.3mg/kg,而
0.2%大豆肽饲料添加剂组的蛋黄中。类胡萝卜素的
含量为35.8mg/kg,类胡萝卜素含量提高了近3倍。
而且蛋黄中的类胡萝卜素并不是从肽类饲料添加剂
中沉积而得,因为肽类饲料添加剂中的胡萝卜素含
量极低为0.03mg/kg,与基础日粮的类胡萝卜素
55.6mg/kg相比,仅可以提供微量的类胡萝卜素
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http://www.cqvip.com0.1mg/kg。由此,可以说明肽类饲料添加剂有助于外
界(如饲料中)的天然类胡萝卜素沉积到蛋黄中。类
胡萝卜素具有抗癌、抗氧化、抗心血管疾病以及维护
视力的作用,所以类胡萝卜素的大幅度提高可以使
得大豆肽在生产抗癌、抗衰老、抗心血管疾病的功能
性禽蛋工业中有广阔的应用前景。大豆肽与类胡萝
卜素的吸收代谢的关系正在探讨中,可能因为类胡
萝卜素作为脂溶性物质,它与脂肪的消化、吸收和代
谢结合进行。而大豆肽对类胡萝卜素的调节作用是
通过对脂肪代谢的间接作用来实现的。
3.5 大豆肽可作为幼龄动物营养佐剂。减少腹泻的
发生
小肽能有效刺激和诱导小肠绒毛刷状缘酶的活
性,并促进动物的营养性康复。存在于绒毛膜中酶活
性提高,表明酶水解蛋白的能力提高。肌体对营养物
质的吸收能力加强。当日粮中蛋白质和游离氨基酸
浓度过高,容易引起动物的腹泻。当日粮中配入一定
浓度的肽液后,可以避免此问题发生。由此可见.小
肽对于消化道发育未成熟、消化酶活性低的幼小动
物更具应用价值,它通过诱导小肠中一些酶活性的
提高,而使小肠消化功能发育提前。促进幼小动物的
健康和提高其生产性能。有研究表明,婴儿腹泻时.
由于小肠粘膜受损,刷状缘肽酶活性降低.摄人完整
的蛋白质不能被良好地消化吸收.反而会加重腹泻.
而此时二肽的吸收基本不受影响.肠粘膜细胞浆对
二肽、三肽还有一定的消化能力,因而认为二肽、三
肽对预防和治疗仔猪腹泻会有一定的作用。
3.6 大豆肽可作为肠道菌群调节剂。增强肌体免疫
力
大豆肽具有促进
微生物生长发育和活跃代谢的
作用,相同氨基酸组成的大豆蛋白和氨基酸无此效
果。赵芳芳等在蛋鸡基础日粮中加入0.2%的大豆肽.
结果表明大豆肽能极明显的促进和刺激蛋鸡胃肠道
(包括嗉囊、空肠、盲肠和直肠)中常驻有益菌一乳酸
菌的生长,数量提高1O~15倍。并能抑制大肠杆菌
和其它一些好氧菌(如沙门氏菌、梭菌等)的生长繁
殖 ]。在反刍动物方面,体外研究显示:通过与一定
浓度的底物结合,肽比游离氨基酸有更大的促微生
物生长的效果。肽可以被整合成微生物菌体蛋白.而
且是瘤胃微生物生长所必需的。使用1~lOOmg~的小
肽一氨基酸混合物,可以增加瘤胃有益菌群合成菌体
蛋白质的能力,只要lOmg/1的小肽浓度即可达到有
益菌生长最理想的浓度。肽还可以为纤维分解菌生
长提供支链挥发性脂肪酸,保证了瘤胃内纤维物质
的充分消化。
3.7 大豆肽可满足畜禽的营养需要,提高动物生长
于长青等:新型绿色饲料鳌 二 皇 些垄些些
速度和生产性能
一些试验观察发现。饲料中添加少量肽类可显
著提高动物生产性能和饲料利用率,其提高生产性
能的作用.似乎不能仅仅从提高微量的氨基酸或增
加蛋白质合成
原料来解释。据报道,当以小肽形式作
为氮源时.整体蛋白质沉积高于相应游离氨基酸日
粮或完整蛋白质日粮。动物某些组织对因代谢修饰
处理而引起的代谢改变,造成的氨基酸需求量增加
完全可通过利用寡肽来满足。可见利用小肽而不是
氨基酸取代蛋白质可以优化低蛋白日粮。从而降低
集约化畜牧系统动物的氮排泄量。许多文献都支持
生物活性肽具有重要的营养价值这一观点。1993年
Siemensma等提出了肽类营养价值高于游离氨基酸
和完整蛋白的几个原因:转运速度快、吸收率高、抗
原性小以及有益于动物肌体的感觉特点。目前。一些
生物活性肽制品已经应用于实际生产。并取得了良
好效果。美国俄亥俄州立大学的Don Mahan博士评
估了寡肽在阶段二(断奶后14~42d)期间对猪只的效
果.寡肽以2.75%的比例添加到玉米一豆粕日粮中.
另外一组配方相似但含有喷雾干燥血粉的饲料作为
对照组,该试验共使用了68头早期断奶猪只。在试
验结束时,饲喂寡肽的猪比对照组多增重l,5kg,但
两组之间的饲料转化率并没有明显区别。而饲喂寡
肽的猪只有较低的血浆尿素氮数值.表明饲喂寡肽
的猪具有较大的蛋白质沉积率。施用晖(1996)在蛋
鸡日粮中添~tld,肽制品后。蛋鸡的产蛋率、饲料转化
率明显提高[13]。
4 大豆肽的生产方法
传统的大豆肽制备方法一般是酸解和碱解法.
但这两种方法易破坏大豆肽的营养成分且造成环境
的污染,已经很少应用。目前应用最多的是酶解法.
其次是微生物发酵法。
4.1 酶解法
酶解法制备大豆肽选用的酶有木瓜蛋白酶、菠
萝蛋白酶等植物蛋白酶;胰蛋白酶、胃蛋白酶等动物
蛋白酶;枯草杆菌、地衣芽孢杆菌、放线菌、青霉、栖
土曲霉、黑曲酶等微生物蛋白酶。现在应用比较广泛
的有中性枯草杆菌蛋白酶1398、209与27o9碱性蛋
白酶。酶解法制备的大豆肽会有苦味产生。其中的苦
味物质主要是亮氨酸、蛋氨酸等疏水性氨基酸及其
衍生物和一些小分子的肽类[14J。蛋白质水解产生苦
肽的可能性与疏水氨基酸的含量、多肽氨基酸的顺
序及多肽的空间结构有关,采用不同酶水解大豆蛋
白得到的苦味肽也不同[ ]。目前大豆肽脱苦的方法
有选择性分离法(如活性炭法)、掩盖法(用环状糊
精、多磷酸盐、谷氨酸等掩盖苦味)、膜分离法(超滤
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http://www.cqvip.com法)、酶法和微生物法。
4.2 微生物发酵法
微生物发酵法实质上是微生物蛋白酶在起作用。
常用来发酵制备大豆肽的微生物有枯草杆菌1.398、
s114、172,放线菌,栖土曲霉3.942和碱性蛋白酶生产
菌株芽孢杆菌2709。短小芽孢杆菌289、209等,以及
酸性蛋白酶生产菌黑曲霉3.350。宇佐美曲霉变异株
537。肉桂色曲霉No.8l和酱油工业用的米曲霉3042
等。微生物发酵法与酶解法相比,它将微生物产酶和
水解两步合一,省去了酶的分离和提纯步骤,减少了
生产工序,降低了成本;因为微生物产生的端肽酶对
小肽末端的修饰作用。使制得的肽不但没有苦味,还
具有发酵的天然芳香味。适口性很好。
在微生物发酵生产的过程中。决定生产水平高
低的最主要的因素有3个:生产菌种、发酵工艺和后
提取工艺。其中最重要的是生产菌种。通过诱变选育
高产菌株可以大大降低发酵生产韵成本。
4-3 大豆肽的精制
食品级大豆肽的精制通常要通过脱色、超滤纯
化、离子交换除盐、浓缩或喷雾干燥等工序。饲料级
的一般只需超滤纯化、浓缩或喷雾干燥即可。
4.3.1 活性炭吸附
活性炭吸附法是常用的大豆肽脱苦、脱色方法。
一般采用固液比l:10,温度40~50% ,进行搅拌
30rain,冷却后过滤。可得到较好口味、溶液透明澄清
的大豆肽液。
4-3.2 超滤处理
与其它分离技术相比,膜分离能提高产品的纯
度、不破坏产品性能、节约溶剂或试剂。而且它无相
变、工艺设备简单、操作方便可靠、能够实现连续化
分离纯化、缩短生产周期,同时不会造成环境污染。
超滤过程中,可根据膜截留分子量的大小将大豆肽
分离成不同分子质量的大豆肽产品。超滤时的温度
一般为35 O℃ ,进口压力4.8xl05~5.2xl0SPa.出口
压力1.6Xl05~2.2x l0 ,a
4.3.3 离子交换
进行离子交换处理的目的是脱盐。脱除离子主
要是Na’和cl一。将大豆蛋白酶解液以每小时l0倍柱
体积的流速分别流经H+型阳离子交换树脂和OH一型
阴离子交换树脂来脱除Na+和Cl一,脱盐率在85%以
上。所脱除的盐主要来源于酸沉、中和调浆及水解过
程中所加入的酸碱生成的盐。
4.3.4 浓缩或喷雾干燥
分离精制后的大豆肽溶液首先经135~C、5 的超
高温瞬时杀菌,然后在86—89kPa的真空度下进行真
空浓缩,得到固形物含量25%,-,40%左右的成品大豆
肽浓缩液。大豆肽浓缩液也可进一步进行喷雾干燥,
得成品粉末大豆肽。喷雾干燥的条件为:进口温度
125~130~C。塔内温度75~78%,排风口温度80~85%。
5 展望
大豆肽的发现开创了动物营养的新纪元,丰富
了大豆制品的种类,增加了大豆产品的附加值;肽较
之游离氨基酸的重要性之一在于可提高动物对日粮
氮利用率的巨大潜力,减少畜禽含氮物质的排放,这
对于节约蛋白质饲料、减轻环境污染具有重要的经
济和社会意义。随着微生物发酵法制备大豆肽技术
的问世.特别是运用现代生物技术、基因工程来选育
高产蛋白酶菌株。进而降低发酵成本,将使大豆肽在
畜牧业中大范围的应用成为可能。因大豆肽独特的
理化特性和生物学功能。使大豆肽制品在畜牧业中
将会有巨大的市场。特别在世界各国都在纷纷禁用
或限制抗生素的使用,提倡生态农业、绿色饲料和畜
牧业可持续发展的2l世纪,研究和开发大豆肽更具
广阔前景。
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