GB 4789.2-94 菌 落 总 数 测 定

中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准食品伙伴个性空间 VV@+h1CQyJ

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食 品 卫 生 微 生 物 学 检 验食品伙伴个性空间al*z0XMF7S)p
GB 4789.2-94

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菌 落 总 数 测 定食品伙伴个性空间 d.xeGWG4grs

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代替GB 4789.2-84食品伙伴个性空间!H H,~6DPT'`\

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Microbiological examination of food hygiene食品伙伴个性空间%?Bq9mh!@5G

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Detection of aerobic bacterial count

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主题内容与适用范围食品伙伴个性空间&[ m e N7{2d
食品伙伴个性空间7Uv:GG/s hI-\
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本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。
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tG0本标准适用于食品中菌落总数的测定。
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术语食品伙伴个性空间0u] t,_#pO q/n-qM
食品伙伴个性空间|r0eJ7I
菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培基成分、培养
9r|B\!k-{0温度和时间、pH、需氧性质等),所得1mL(g)检样中所含菌落的总数。 本方法规食品伙伴个性空间1AK3Idh7qn
定的培养条件下所得结果,只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的食品伙伴个性空间!j }r"g5N$Zc?NL
菌落总数。食品伙伴个性空间
m/t c%A&HXtN&z-D
食品伙伴个性空间{mp7Q(ry+r
菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细
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h#J i0菌在食品中繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
8a2N#HYc,v0食品伙伴个性空间![q%h/yX
3
jD.i,k v|O0引用标准
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-lNO l:@y4\!~0食品伙伴个性空间Y5vo.s d1Q5T(O0y
GB 4789.28食品伙伴个性空间&o^e9t2aRL0zk~
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食品卫生微生物学检验
"xG#Lx7~&z`V&\0染色法、培养基和试剂
^|-Yp2Z4f B7G0
5LRx8xl.q)T[$S:d04食品伙伴个性空间#D(`Oko aGo/N2E
设备和材料
|4f9\:d9H04.1 温箱:36±1℃。
a$pU9on2`04.2 冰箱：0～4℃。
x|EJ7eI"[R4MBLD04.3 恒温水浴 :46±1℃。食品伙伴个性空间a)WK'\)Fez6|
4.4 天平。
5?^G,kbTSmB04.5 电炉。食品伙伴个性空间OfTDqi
4.6 吸管。食品伙伴个性空间-~/\zI't
4.7 广口瓶或三角瓶:容量为500mL
3r8YuZ6l+H]$r04.8 玻璃珠:直径约5mm食品伙伴个性空间4L3zI gJv2L
4.9 平皿:直径为90mm
0f*l+zN.y4JU3[04.10 试管。
2M0QA0n:n
?04.11 放大镜。食品伙伴个性空间 ?)}8w+a m&p#\[
4.12 菌落计数器。
,f,Q?z1a*@w04.13 酒精灯。
rl-f}[e8V04.14 均质器或乳钵。食品伙伴个性空间%y?~;| \2~o`
4.15 试管架。食品伙伴个性空间 x4wKc7Xw
4.16 灭菌刀或剪子。
%KBssKq,c V04.17 灭菌镊子。
5}SfM `0
S"s"jJd F%})M4nL&D05食品伙伴个性空间`hRF:y\
培养基和试剂食品伙伴个性空间e)}+e1gp$OLH
5.1 营养琼脂培养基:按GB 4789.28中4.7规定。
#ZCH1sB9nJ_05.2 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。食品伙伴个性空间7D1a
a-EH
5.3 生理盐水。食品伙伴个性空间+HN0jatK
5.4 75%乙醇。食品伙伴个性空间0XMS[7I

9\c6XU }M06食品伙伴个性空间2G&_}"z6p-J
检验程序食品伙伴个性空间"Xqc4x#s8jg$y
食品伙伴个性空间$lH$Fg&k$U(G _&|!~g,S
菌落总数的检验程序如下
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#s,u4jpct0┌────┐食品伙伴个性空间*lc,r*R4ePV+|

w:V| I#i0│ 检
H C:O O{H;O0样 │
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2}$B*}r'Af Hu0食品伙伴个性空间6A:Y$ZL.S
┌────────────┐
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n m]`[4{0│做成几个适当倍数的稀释液│
dT$s+nDz0食品伙伴个性空间 H3G,CD\
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└────────────┘
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↓
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┌───────────────┐食品伙伴个性空间N%O mtV+|*NX,\

@wan&M@z#]0│
1n,WpG tJ$yn(J\0选择2-3个适宜稀释度
1GpJ1ti0│食品伙伴个性空间 @,@Mp#B8E'xGf:V;d,F

YF!JA*r3k0│ 各以1mL分别加入灭菌平皿内
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│ 每皿内加入适量营养琼脂 │食品伙伴个性空间s^#}$v'oQ U!N0r
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36±1℃ ↓ 48±2h
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│菌落计数│食品伙伴个性空间e0upo)~v^!G
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3W1Nw$Uv_5DL8w0操作步骤
;]*EzM.i%H\gN07.1 检样稀释及培养食品伙伴个性空间:Fc0`|A+WpX
7.1.1 以无菌操作,将检样25g(或mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀食品伙伴个性空间!a{"a&E:QF
释液灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研食品伙伴个性空间]2b7T!^+h3G'sN/{X
磨做成1:10的均匀稀释液。食品伙伴个性空间K-n2I])j$CN/sB3d
食品伙伴个性空间^#bB&LY&I]2v
固体检样在加入稀释液后,最好置均质器中以8 000～10 000r/min
@zU9@[aq0的速度食品伙伴个性空间+y@8_} aH2JA
处理1min,做成1:10的均匀稀释液。食品伙伴个性空间K_Zn&B
7.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL 灭菌生理盐
g?q;y0X0水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液), 振摇试管,混合食品伙伴个性空间J7LA8ShN&X`
均匀,做成1:100的稀释液。食品伙伴个性空间tY6NfiL0s0W
7.1.3 另取1mL灭菌吸管,按上条操作顺序,做10倍递增稀释液, 如此每递增稀释食品伙伴个性空间%`6c;wG {t
一次,即换用1支1mL灭菌吸管。食品伙伴个性空间 Vy8o:W4cDJK
7.1.4 根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计,选择2-3个适宜稀释度,食品伙伴个性空间j}9O4]X,y
分别在做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1mL 稀释液于灭菌平食品伙伴个性空间o0t1_7[5\E/S:J
皿内,每个稀释度做两个平皿。食品伙伴个性空间Df)A&X%Q`$W a+I4M
7.1.5 稀释液移入平皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置于46±1℃食品伙伴个性空间4]%CIn]m
水浴 保温)注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾食品伙伴个性空间Q"KE__Ej
入加有1mL稀释液灭菌平皿内作空白对照。
d#u z {0^ W07.1.6 待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h
)K^Z y/Ih2{ o07.2 菌落计数方法食品伙伴个性空间8LjL0S+`'s1^

3_{W7k%q!wc0做平板菌落计数时,可用肉眼观查,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下
U@ K2}v;fs0各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平析平均菌落总数。食品伙伴个性空间0e6T _'RJ,j
7.3 菌落计数的报告食品伙伴个性空间dq`kUF
7.3.1 平板菌落数的选择
_#@*|^,N(T |Y i0
*W-V7kU5~+s0选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用食品伙伴个性空间 K;tM^}'[,]8L {K
gh
两个平板,应采用两 个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时, 则不
*[*a,U I| S0宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数, 若片状菌落不到
7n4jz tm7ij0平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘2以代表全食品伙伴个性空间mq{Sb'G"K
皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线) ,若仅有一条链,
.F|kJ'c j[0可视为一个菌落;如果有不同来源的几条链,则应将每条链作为一个菌落计。
*L&mHq?7X'T07.3.2 稀释度的选择食品伙伴个性空间F"n1gp
c
7.3.2.1 应选择平均菌落数在30～300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之(见表
Z$|1oodTx-@ a0中例1)。
6~,M ]!y|G07.3.2.2 若有两个稀释度,其生长的菌落数均在30～300之间,则视两者之比如何
~D#VZ?|Y3H0来决定。若其比值小于或等于2,应报告其平均数;若大于2 则报告其中较小的数
+^0Q?0w[/L0字)见表中例2及3)。
*X?9R'b_^07.3.2.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300, 则应按稀释度最高的平均菌落
;EEr(mM3HwpZA0数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)。食品伙伴个性空间 @i8Y3d.L
7.3.2.4 若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数食品伙伴个性空间$jl(pl {
乘以稀释倍数报告之(见表中例5)。
t8[9@,Z!}2zF7w07.3.2.5 若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数报告之(见表食品伙伴个性空间2['Gs(}0c:e
中例6)。
GC3ugX.Q-M07.3.2.6 若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间,其中一部分大于300或食品伙伴个性空间9Ze&@[O&d7s6X
小于30时,则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例7)。
\.uB-h`"TA07.3.3 菌落数的报告
.r/jjhYa0食品伙伴个性空间%dO7H:O|,C M}U
菌落数在100以内时,按其实有数报告,大于100时,采用二位有效数字, 在二食品伙伴个性空间 Io QI(m
位有效数字后面的数值,以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数, 也可
)|}(BxN0用10的指数来表示(见表中“报告方式”栏)。食品伙伴个性空间%S;BMK2g]gqDP

Vs wA;i+D(b(T0稀释度选择及菌落数报告方式食品伙伴个性空间,D(G1Ak(~
──┬─────────────┬────┬────┬────────
R,Z5uf4i@q0例次│食品伙伴个性空间4~"v_a I7R:DSG2El*~
稀释液及菌落数
H1U
ax6H6D*r)]9[0│两稀释液│菌落总数│食品伙伴个性空间6| O@ `1t+DY:v
报告方式
&f Y#~y"raq|0食品伙伴个性空间@I K$f\ba$o.D
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之比食品伙伴个性空间"c3Pg&YV~r
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%b3RR\y0个/g或mL食品伙伴个性空间 X:@,fQxc-~ut
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│
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│多不可计│食品伙伴个性空间^"Hj iO
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│ 30500食品伙伴个性空间f0N4o
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│食品伙伴个性空间7T2FdyG7{
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"Sgm\.J%I@3U0食品伙伴个性空间
ohl.NEs1lx

b#dD2wEus9M)~_0附加说明:
Y'PL/R4|*f3W_8AD0食品伙伴个性空间4S5U(XE lXV
本标准由卫生部卫生监督司提出。食品伙伴个性空间 @ _Qs#@2h
食品伙伴个性空间@O]+e5B~%L-Q9d$b)_
本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。食品伙伴个性空间 Y*E H-S+T4_*[Jw
食品伙伴个性空间P+D"pPCO,yL|~3W!gh
本标准主要起草人刘宏道食品伙伴个性空间].o)|?@*_
食品伙伴个性空间s+GsA h
本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。
[(Q!w,td0
@^,m nK f6J5J0───────────────────────────────────食品伙伴个性空间!Ir A cho z|p+B7y
中华人民共和国卫生部1994-03-18批准食品伙伴个性空间qY%Jpz%N^ X
1994-09-01实施