中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 大 肠 菌 群 测 定

中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准食品伙伴个性空间"[PEZ4Z:q3\

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食 品 卫 生 微 生 物 学 检 验食品伙伴个性空间-c-~z u9aOc
GB 4789.3-94

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G"`5o`zg|w0

大 肠 菌 群 测 定食品伙伴个性空间y9O2KUp$N1^$a

C*n@;h0md.{I0

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代替GB 4789.3-84食品伙伴个性空间M;t5gTl[sXu:L

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Microbiologicl examination of food hygiene

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Detection of Coliform bacteria

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---------------------------------------------------------------------------

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食品伙伴个性空间0X1_.X)K$q#XZ'B

8lw.g0c8}5?01
-cU2S1LZ2SpF-Y0主题内容与适用范围
q,yu&Iu\1kr0
u7PHoY#EH W0本标准规定了食品中大肠菌群的测定方法。
iw[5v6p0B2q#P/?0食品伙伴个性空间,t3a u`C Y3f?
本标准适用于食品中大肠菌群的测定。
{+W3s0g
\0食品伙伴个性空间_ E4k/]j&zt
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术语食品伙伴个性空间 e*}&L#y(m#|

/L{kt0uC0大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽
\ [*`;r7G#s2@ Xu$_0胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质
FK]wh R0量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。
x;C2W5N X)ZM0
2R I7t6tE
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sHj0食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。
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@z JiZ%[03食品伙伴个性空间!SU#F)li!`b
引用标准
Y^:@.J f0食品伙伴个性空间x9D"af:uO6H%}
GB 478.28食品伙伴个性空间9m&X3u SYL3nWI
食品卫生微生物学检验
a/~Mq X!u0染色法
$F(mT yxs]0培养基和试剂食品伙伴个性空间"h*v(Y$I`7[`H {b

p4vYs!|%K,avPb04
+T#kd Ga` CK0设备和材料
\s.oz[L j!ME)v04.1 温箱：36±1℃。
g%x+n0vJH|04.2 冰箱:0～4℃。
RovD'O$]-H'~ g0G7dn04.3 恒温水浴 :44.5±0.5℃。食品伙伴个性空间| OC rkC
4.4 天平。
H3G6a8]Bw;CZ
P8v04.5 显微镜。食品伙伴个性空间dR;S$X?W@d
4.6 均质器或乳钵。食品伙伴个性空间#l_.N$CK_7H
4.7 平皿:直径为90mm。
0JFR,BZ04.8 试管。食品伙伴个性空间/n{aGAWu0E
4.9 吸管。食品伙伴个性空间EB)WfaW4|Rw
4.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL。
Y{;Ks Q*U1w04.11 玻璃珠:直径约5mm。
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bYe3d,J04.12 载玻片。
WG E0m0b,w+[04.13 酒精灯。食品伙伴个性空间3k1Dt/t['g
4.14 试管架。食品伙伴个性空间"`6@4n"}y:CH
食品伙伴个性空间%vC:Yy`.EM
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n2VY]
v+E"g0培养基和试剂食品伙伴个性空间"WFx*h{6n Dx)S
5.1 乳糖胆盐发酵管:按GB 4789.28中4.9规定。
.{BYKZ)}3G|
G05.2 伊红美蓝琼脂平板:按GB 4789.28中4.25规定。
#I#l6F9RA3pb05.3 乳糖发酵管:按GB 4789.28中4.10规定。食品伙伴个性空间`Ti Y9x
5.4 EC 肉汤:按GB 4789.28中4.11规定。
K!W7Et&kkn:T t05.5 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。
l#v[ur/D:k05.6 生理盐水。
YM:V5`\U!V05.7 革兰氏染色液:按GB 4789.28中2.2规定。
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q&sS!z0食品伙伴个性空间d1nQ m:hP&p
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检验程序食品伙伴个性空间9U1a|N&Wa3Pr f
食品伙伴个性空间7y?
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大肠菌群检验程序如下:
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检样
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产气
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│大肠菌群阴性││ 伊红美蓝琼脂平板食品伙伴个性空间ml i-}P IXe5C
│
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│食品伙伴个性空间uEVeQ:?-c
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乳糖发酵管食品伙伴个性空间T0_@B|{mynX ]
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│食品伙伴个性空间+SwF%M;?_'m
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5ASn4n1w,Y0食品伙伴个性空间!F3iYgz9e
│革兰氏阳性││革兰氏阴性食品伙伴个性空间B |(w9bZU
││
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││ 不产气
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食品伙伴个性空间 VJ U U/u4qf+h
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食品伙伴个性空间V#]R
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┌┴───┴─┐┌────┴─┐食品伙伴个性空间G{'Hn;X)RD \&Z[4j#k4t
食品伙伴个性空间1G&QkByAo.Z
│大肠菌群阴性│
g}a(o^,`YJM0│大肠菌群阳性││大肠菌群阴性│
gK4X2H&@Ls0食品伙伴个性空间+JRsmT4car
└─┬────┘食品伙伴个性空间Q`ZT6S!Ajp
└───┬──┘└────┬─┘食品伙伴个性空间}l~?4D g
食品伙伴个性空间4jDC+C)o8q
┌─┴───┐食品伙伴个性空间 \1e:h6{wU
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┌───┴─┐
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报
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7
@WI[J [W0操作步骤食品伙伴个性空间 i5\4|%\1la;r'av
7.1 检样稀释食品伙伴个性空间9De1uE/A G2w
7.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌食品伙伴个性空间 N~v2Q6Rj
玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的食品伙伴个性空间i*p ?US_"A|
均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8 000-10 000 r/min的速度处理1min,做成1:10食品伙伴个性空间~ Gs3m1} a
的均匀稀释液。
Q+k
O*~?2S,s*{!O07.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液食品伙伴个性空间UlH G.z
的试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液。
g3b;K"m\8b.G5R3JP}07.1.3 另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1
8J |Ew`Z^0支1mL灭菌吸管。食品伙伴个性空间d.j#O(q)W7VS
7.1.4 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释
vRcg$|`^K+O0度,接种3管。食品伙伴个性空间&a v"@6I7{*r/r
7.2 乳糖发酵试验
/rb B^\eZ&Z0食品伙伴个性空间B2Tw~g
将待检样品接种于乳糖 胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发食品伙伴个性空间 ]$SYXGY"T
酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36±1℃食品伙伴个性空间+oG_(S~
温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如食品伙伴个性空间M%SR*\cM']J.q
有产气者,则按下列程序进行。
8r6Hz#z5ZBQ07.3 分离培养
q{9{e/vS
@-\ @ [{0
K~2{%r9_K0将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃ 温箱内,培养18-24h,
:{C&\
W0[
N0然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。食品伙伴个性空间?aDYvD:O8B `H
7.4 证实试验食品伙伴个性空间?Q"_v DPSn8t

,tG-e}1E"M F0在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵食品伙伴个性空间%R.hgJ4v#M(z%lrx3RD
管,置 36±1℃温箱内培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为食品伙伴个性空间&~2_Bjg!w_d%B
阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。食品伙伴个性空间%ikV"a"tW
7.5
]D'mox/`b0报告食品伙伴个性空间-N rn.Uq,@
食品伙伴个性空间 Vb5Ex*s
根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值。食品伙伴个性空间| ?/tAL:E!mR

+MJ1Am)OJ08食品伙伴个性空间%[7K,v#]:O*|
粪大肠菌群(faecal coliform)
;@X s]3N08.1 用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物(见7.2条)转 种于EC肉汤管内,
D8{ K
q8eA`TR]0置44.5±0.2℃水浴箱内(水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面),培养24±2h,经培养
2VTA9t'lAt0后,如所有EC肉汤管均不产气,则可报告为阴性;如有产气者,则将所有产气的EC肉食品伙伴个性空间 ^{C1~,y'm5}_
汤管分别转种于伊红美蓝琼脂平板上,置 培养18-24h,凡平板上有典型菌落者,则证
uU'R6Lm"@0实为粪大肠菌群阳性。食品伙伴个性空间8{Fm5B6c(h
8.2 结果报告食品伙伴个性空间Dk;yoM6N3jc

fU~(b8e2y)A0根据证实为粪大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)粪大肠菌群
0Sl8ohg;O;w,m }0的MPN值。
K2A1l+R~$R n#z0食品伙伴个性空间Ft_`,M"\
大肠菌群最可能数(MPN)检索表食品伙伴个性空间t3n9Q%MQ9~
┌──────────────────┬─────┬─────┐
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N-^:L w+i0│
i;D,D]Qo%o[6rRL0MpN
5Y D7[9{7kg}t
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├─────┬─────┬──────┤100 mL(g) ├──┬──┤食品伙伴个性空间kcjNRjx*k6Z0t!n-`
│1mL(g)，*3│0.1mL(g)*3│0.0lmL(g)*3 │食品伙伴个性空间%Pk~$]dY9{
│下限│上限│
@)L4u e*Zy8SK0├─────┼─────┼──────┼─────┼──┼──┤食品伙伴个性空间fCC!H _p2f
│
#o-M5zcq00
g K'L.wP2Mxu0│
x}d[G5`4s00食品伙伴个性空间F
^(NL4d!W%U i
│
%[(xD{J pPI00食品伙伴个性空间7}k1BH6RX#^hcn3i
│ ＜30食品伙伴个性空间NP1x b5zz3y L
│＜5│食品伙伴个性空间 OG1O/}y"j5d
食品伙伴个性空间S6PI:J4b3}
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dD._0│食品伙伴个性空间8_+} G9b.n%F2C)h
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│食品伙伴个性空间$Dt0C8oA:B7Q'i5Ve
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│食品伙伴个性空间rM!}0HR7Fq v
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}fHJ vS0│食品伙伴个性空间2]V$P{'w0uD%Y
│
Z DR j }2P(Tt0│食品伙伴个性空间"u[o:|Z;QL|
│食品伙伴个性空间`R DQ*n&}/V SD.I
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t*u k+nC0RCi0t\0│食品伙伴个性空间Nd(N.j r)M8U1K
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│食品伙伴个性空间0T4E$i0f8fY
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│食品伙伴个性空间TFV-v&m k
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&[VI0B c0v-Xr0│食品伙伴个性空间6FzGa
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│90
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│食品伙伴个性空间.{X9aIu+_1U
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N5}@!A6z&`00食品伙伴个性空间/[+W6u\4{P,ZAQc
│食品伙伴个性空间kRLz,?4]*ISu
3食品伙伴个性空间#kqk3q#s6T
│
7ID9qC+VHu9oxR030
+b9ud l7vZ5Ij/j0X0│食品伙伴个性空间/U4^;RpK}f
│食品伙伴个性空间{c&Q8F F#T0q5h
│食品伙伴个性空间4An XzH%k
├─────┼─────┼──────┼─────┼──┼──┤食品伙伴个性空间y K8_C*Vu!`"y
│食品伙伴个性空间.Aj|fU!Q8e6y1`
0食品伙伴个性空间1{}([%b6LXz@
│
'l\:mu+B8GMT01
%M3\U1|+Wo0│
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│
a?Hv x`:}030
!e8~:xn8A"Eo|$?8L0│＜5│食品伙伴个性空间N?!T?Q9E1kt#V
│
W\N6G&||0│食品伙伴个性空间)sVY#d8nGNT3g
0食品伙伴个性空间_1b^
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│食品伙伴个性空间$V'O"`6qz2`J.Q5hH
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│
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│食品伙伴个性空间 ^mO]qL:u(Q
60食品伙伴个性空间6Y+xs:n
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│食品伙伴个性空间:O7S0i$X/v5R8f9P
│130 │食品伙伴个性空间`Y/wM*O:{V%]-^u
│
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│食品伙伴个性空间/b
s(V/f `.bg/Di'a
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DLu;R
│食品伙伴个性空间I0T
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D(o'B,g2}*U a0│食品伙伴个性空间r8o"o4N
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/su#lsyk4wU&d:ub0│食品伙伴个性空间Odn F~Qb
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│
#I7eKO;a ZL00食品伙伴个性空间vt*E2xs U
│食品伙伴个性空间(f+J1bXgo'n~/k6W?(f
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|c? I-t-U;T#g U E0│食品伙伴个性空间b+^1jR8Gm2R
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Ll%xw%g;p+p0120食品伙伴个性空间1@%l(f \A#R'Z'P
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[Y aHV.z0续表
s e+M0e7cKLpv0┌───────────────────┬────┬─────┐
Q]5r8n3X Gn8Tq0│
o/oH$F? k0阳性管数食品伙伴个性空间@'@ we?8Y6a6_0_1Z
│ MPN食品伙伴个性空间_;`4Cr0nV$QO
│95％可信限│
v*c)Yx(dY0├─────┬──────┬──────┤100mL(g)├──┬──┤
'Ja.\z#nl0│1mL(g)×3 │0.l mL(g)x3 │0.0lmL(g)X3 │食品伙伴个性空间 JW)f^J)d
│下限│上限│食品伙伴个性空间vM lf*Ga%m
├─────┼──────┼──────┼────┼──┼──┤食品伙伴个性空间MIG1Q0?3W
│食品伙伴个性空间;U`k9kt:_
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│
)^tt(MQ"VW02
m
su GJF1W:vC0│
sm}J-qwx00
y9\'z)\ nHRF0│食品伙伴个性空间1eE-Z bQ*nq3Wk:U
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│
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p6z H!d*h$yBi0│食品伙伴个性空间vf~ _ r8DM]
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│
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│食品伙伴个性空间#x2|(@ai7`
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│
&l/P C9Gvy$`*r"b0160
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└─────┴──────┴──────┴────┴──┴──┘ 注:①本表采用3个稀释度〔1mL(g)/0.1mL(g)和0.01mL(g)〕,每稀释度3管。　
&[5pT9P+|$]y0②表内所列检样量如改用10mL(g)、1mL(g)、和0.1mL(g)时,表内数字应相应降低10倍;食品伙伴个性空间f&A;zP+YF1P*?
如改用0.1mL(g)、0.01mL(g)和0.001mL(g)时,则表内数字应相应增加10倍。其食品伙伴个性空间kV s5Le
余可类推。
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本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。食品伙伴个性空间L2FP?.m9W

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本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。食品伙伴个性空间&zxLg-o*~/j^!z |
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中华人民共和国卫生部1994-03-18批准食品伙伴个性空间*Dw1{*P'~j
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