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中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 大 肠 菌 群 测 定

上一篇 / 下一篇  2007-03-30 18:45:41

中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

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食品伙伴个性空间| X[Q#_QV(LX)J

食 品 卫 生 微 生 物 学 检 验
'R'KO9j.k0GB 4789.3-94

J2jB$a4{ } H9jj8z\0

(yJ(V5r3w1^TX(l0食品伙伴个性空间#S` wt1y

大 肠 菌 群 测 定食品伙伴个性空间 Y#Gul1X/_|4o

p)y-Hc m.\&W0食品伙伴个性空间)CU4vH(LL)i

代替GB 4789.3-84

c(~|+sOH'P%L1Z#s3q0

)t8pY%DsyCD y0食品伙伴个性空间$Z{6ndP1_.K

Microbiologicl examination of food hygiene食品伙伴个性空间eK*r,eP

食品伙伴个性空间j]jP9\'MT

5ry+}[L1M8^0

Detection of Coliform bacteria

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1
OJQb8S9A,t0主题内容与适用范围
Se} OG1Z$sl0
j7O9W,d$MecK+KS0本标准规定了食品中大肠菌群的测定方法。食品伙伴个性空间R:_ v3AE]9l5r

#[ ]"I?li a ]0本标准适用于食品中大肠菌群的测定。食品伙伴个性空间r~3CA+OF$b

oF;Hjg!V%L)b02食品伙伴个性空间/y\[+cF9y
术语食品伙伴个性空间1h#EXI Fu&v2V]-i8]
食品伙伴个性空间P5h^%n'J${
大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽食品伙伴个性空间_ JHt9Ro
胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质
v)[4t:~(j5U9t0量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。
#pw?oG'ba9aS0食品伙伴个性空间,}|C-x5E5L gy
食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。
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3
m8B'Tu {.h1mL{ h0引用标准
]8w;R t7T0食品伙伴个性空间.G _t3R@)Wj@ B d
GB 478.28
`"d;Q!ldsa-r)y0食品卫生微生物学检验食品伙伴个性空间l;O {d [
染色法
D*h8lf^ m"u0培养基和试剂
:n/]UrH-e3`0
Za8Le3vOy:S2I04
N)bd C T0设备和材料食品伙伴个性空间L-o {9Q0iN
4.1 温箱:36±1℃。
g vj'fA"D#V6vq04.2 冰箱:0~4℃。
*Uv3d/K9d1[04.3 恒温水浴 :44.5±0.5℃。食品伙伴个性空间u Bzs@
4.4 天平。食品伙伴个性空间&\ x3v2O7U/C
4.5 显微镜。
@H Ph'][)WoQ4l04.6 均质器或乳钵。食品伙伴个性空间FFx+d9?5X-a&n
4.7 平皿:直径为90mm。食品伙伴个性空间 e2M7S#iW+c
4.8 试管。食品伙伴个性空间D \I6I:z6x7R
4.9 吸管。
`Ol(c nt+cb04.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL。
@1x9x'VE^&]V04.11 玻璃珠:直径约5mm。食品伙伴个性空间&q6AN~:n6B
4.12 载玻片。
j ilw C,[ Q8p04.13 酒精灯。
D`w@z:sKP04.14 试管架。食品伙伴个性空间 |4}2oal7\:i?J

6Y/S$JQFM4OL6F05食品伙伴个性空间 Ge&e%{5jC
培养基和试剂
(@LM0QwD"o0A#C&SK05.1 乳糖胆盐发酵管:按GB 4789.28中4.9规定。
6Q |e,n,]\)gg05.2 伊红美蓝琼脂平板:按GB 4789.28中4.25规定。
%[]2t H F]W05.3 乳糖发酵管:按GB 4789.28中4.10规定。食品伙伴个性空间aO$c$h3LC O/_
5.4 EC 肉汤:按GB 4789.28中4.11规定。
O9RR%r;s["o05.5 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。食品伙伴个性空间V2zQY k-I&t vY
5.6 生理盐水。
"WX%@0Re+\7Z]Vb05.7 革兰氏染色液:按GB 4789.28中2.2规定。食品伙伴个性空间m&sA J"y'Io
食品伙伴个性空间_b/`7?4f_AM w
6
~8f"L/S e}&[+N `0检验程序
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大肠菌群检验程序如下:
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检样
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│大肠菌群阴性││ 伊红美蓝琼脂平板食品伙伴个性空间CS|5efD.Cm"i;aB

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││食品伙伴个性空间;nDqo([x8h_z
产气
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│大肠菌群阴性│食品伙伴个性空间"`.QDwL6w
│大肠菌群阳性││大肠菌群阴性│
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操作步骤食品伙伴个性空间_3x}&hi4N? d6[|
7.1 检样稀释
F+L1w],Y;rT Kd07.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌食品伙伴个性空间C[nl9Uo/NQD
玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的
?g ]*y;G0均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8 000-10 000 r/min的速度处理1min,做成1:10食品伙伴个性空间fc,e[U fWt;E8r6|
的均匀稀释液。食品伙伴个性空间 G9IPx3V
7.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液
?#|M(A _`0的试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液。
*EJ7R`w!VW07.1.3 另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1食品伙伴个性空间#U\yn@:f2c8H
支1mL灭菌吸管。食品伙伴个性空间XL d5J.e9jB3E
7.1.4 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释
u%CW1@il9@%H/W0度,接种3管。食品伙伴个性空间E#N{CR!y
7.2 乳糖发酵试验
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将待检样品接种于乳糖 胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发食品伙伴个性空间M9z4}nS5XssF
酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36±1℃食品伙伴个性空间'N N!Rlz
温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如
_Nx ],F ^0有产气者,则按下列程序进行。食品伙伴个性空间3`%I2x[]F
7.3 分离培养
+w-R'|3j-z%r7{Z0
'`|pF,@ N0将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃ 温箱内,培养18-24h,食品伙伴个性空间g W0m0}#W;Yv-P/S
然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。食品伙伴个性空间e Y3n#nM6{
7.4 证实试验食品伙伴个性空间^ QPT&Q6B%\

B2s x8n(d0在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵
0RHuB fd ZX0管,置 36±1℃温箱内培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为食品伙伴个性空间#h$N ee@3qp
阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。
%s'Ay B_.h Ogm07.5
w_m-Q#@(W'c0I)]-O0报告食品伙伴个性空间!dh'i5L-X%Gc

EU#N4S.s)g\T}0根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值。
-s M/|{Uv0
2DFh$^"D |9A{9x-O08
'Sb$hUI{/K\7y(W-H0粪大肠菌群(faecal coliform)食品伙伴个性空间y/cx%b7hqB
8.1 用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物(见7.2条)转 种于EC肉汤管内,
X L3Cw@` E0置44.5±0.2℃水浴箱内(水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面),培养24±2h,经培养食品伙伴个性空间N y,\J)z*?$ol4U
后,如所有EC肉汤管均不产气,则可报告为阴性;如有产气者,则将所有产气的EC肉
%o;oHczWG0汤管分别转种于伊红美蓝琼脂平板上,置 培养18-24h,凡平板上有典型菌落者,则证
a*]9bP(@ | tt_0实为粪大肠菌群阳性。食品伙伴个性空间-\+_Y*aZ
8.2 结果报告食品伙伴个性空间R5y1X([sm&B q

)^#vxr;K` \0根据证实为粪大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)粪大肠菌群食品伙伴个性空间(C U8U3Y8AL)P/l
的MPN值。食品伙伴个性空间V^lGc/@i!Xo+A
食品伙伴个性空间W%Tc v7PP
大肠菌群最可能数(MPN)检索表
'W&ox"z8~(|0┌──────────────────┬─────┬─────┐
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阴性管数
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MpN
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├─────┼─────┼──────┼─────┼──┼──┤食品伙伴个性空间k'i(EfY`p

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续表食品伙伴个性空间2^V]v2Sp8m{a
┌───────────────────┬────┬─────┐
0]{BH!s(\+U0
8VF4xs,Q\7[0阳性管数
w a$K_5u+H L9K5O0│ MPN
&Z9Hq S1A&z0│95%可信限│食品伙伴个性空间@+\??9Sw9I
├─────┬──────┬──────┤100mL(g)├──┬──┤
y%@$`;mG,n"k0│1mL(g)×3 │0.l mL(g)x3 │0.0lmL(g)X3 │
5x.kj/j6g-kB3ZR0│下限│上限│
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②表内所列检样量如改用10mL(g)、1mL(g)、和0.1mL(g)时,表内数字应相应降低10倍;食品伙伴个性空间8^D XF7HfI9n
如改用0.1mL(g)、0.01mL(g)和0.001mL(g)时,则表内数字应相应增加10倍。其食品伙伴个性空间p~AuD4Z
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本标准由卫生部卫生监督司提出。食品伙伴个性空间 eq%?3F-d!oV9z4O K
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本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。
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本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。
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引用 删除 Guest   /   2009-04-21 14:40:12
变色不产气呢怎么判定
 

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