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中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 大 肠 菌 群 测 定

上一篇 / 下一篇  2007-03-30 18:45:41

中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准食品伙伴个性空间Z{U)UOD"F V;J

^-VGQ9b#}T&{[0食品伙伴个性空间gbO9h4TVAI

食 品 卫 生 微 生 物 学 检 验食品伙伴个性空间I @I;E0La;S0LT
GB 4789.3-94

pP9`0KV;V$OX0食品伙伴个性空间R)WI3j+P3_2F

食品伙伴个性空间*xf(~d.F

大 肠 菌 群 测 定

pr\NR9bl7DMu0

'A!a\4RvL$W3T0食品伙伴个性空间5y TJ dy!dda$C

代替GB 4789.3-84食品伙伴个性空间j"WY(sGE2d

^ E|&Z,F0ok0ahU~9]0

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Microbiologicl examination of food hygiene食品伙伴个性空间0yOJrg7~3jg0o

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Detection of Coliform bacteria食品伙伴个性空间 c!^\ F}`(~

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食品伙伴个性空间H!X H7vL/W OB$E

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](c3p-r"Ee+[ P01
x"\6c O vfe0主题内容与适用范围食品伙伴个性空间K-M k.?;\6Gl#M.s
食品伙伴个性空间3`8ig/_-{:}2_C
本标准规定了食品中大肠菌群的测定方法。食品伙伴个性空间7h0H+i$n`-}n

-oPS:Zg^0本标准适用于食品中大肠菌群的测定。
j-O~[0oL{@0s0
+y6AF} wa6D02
T/i6i?mP-u i0术语
wOvs;S^.|A0食品伙伴个性空间\ZP$|!z]'x x
大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽
s.|%Q@$\},~$mX0胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质食品伙伴个性空间)E n g.A)C*b#n}
量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。食品伙伴个性空间gm8T3l0I
食品伙伴个性空间5h8Q6\(~:Uo+O.z
食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。
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3
@?%Z|4^.B3@;U0引用标准
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GB 478.28
:H0EZEo)f:V+s l0食品卫生微生物学检验食品伙伴个性空间~dbo z\]
染色法
:R4K]*Hn&C%^;n%d6o0培养基和试剂
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设备和材料
P3{#ux0y04.1 温箱:36±1℃。食品伙伴个性空间eD Cl{3gXF
4.2 冰箱:0~4℃。食品伙伴个性空间 pV)u s KI9ZYb*I X
4.3 恒温水浴 :44.5±0.5℃。食品伙伴个性空间!?*L?7gt @(z M%j
4.4 天平。食品伙伴个性空间9Kd'q%bO!nO6bL;v
4.5 显微镜。食品伙伴个性空间mr SC(U8y1_3E+wPk
4.6 均质器或乳钵。食品伙伴个性空间0r*uB.da5i#e7km
4.7 平皿:直径为90mm。
wM&n"{+qa04.8 试管。食品伙伴个性空间(Zf1qzt,zB)L
4.9 吸管。
^ynrG'N `-qX8^I04.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL。食品伙伴个性空间.BD.`Z@#u T7n^
4.11 玻璃珠:直径约5mm。
-a+s{Gi ]04.12 载玻片。食品伙伴个性空间 FNwK/]'Y{PDX&m
4.13 酒精灯。
y*_4[k2ohdP04.14 试管架。
#S.eD)o*u[%OqT0食品伙伴个性空间K:dqlRg(kL
5食品伙伴个性空间JH%OI D
培养基和试剂食品伙伴个性空间/jQX)PduX e4Z
5.1 乳糖胆盐发酵管:按GB 4789.28中4.9规定。食品伙伴个性空间k lo&p{@rp
5.2 伊红美蓝琼脂平板:按GB 4789.28中4.25规定。食品伙伴个性空间'`6~U9Ekj
5.3 乳糖发酵管:按GB 4789.28中4.10规定。食品伙伴个性空间u_S,b!fV
5.4 EC 肉汤:按GB 4789.28中4.11规定。食品伙伴个性空间P@Z;S0D&kB2u
5.5 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。食品伙伴个性空间v*v w%O(]?8@B
5.6 生理盐水。
+A K8hGL Li8n n0{]05.7 革兰氏染色液:按GB 4789.28中2.2规定。食品伙伴个性空间"d-Sk2b7_

,D+?Nc3d5D"Y'X k Le06
2s!cgPu(db(qw^`0检验程序
-Ns%V8G`s0
U U'S,d%o#U p,tC W$m0大肠菌群检验程序如下:
i j'r q Qn0
G(S E`D(X'F0
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检样
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乳糖胆盐发酵管食品伙伴个性空间,`:U(t$bM8q*A

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┌──┴───┐┌───┴───────┐
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Cj O*a5A,c6I0│大肠菌群阴性││ 伊红美蓝琼脂平板食品伙伴个性空间?9B9\/x7['U(jd
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食品伙伴个性空间)U:pi b4n |l a8Q D
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报告
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└─┬───┘│革兰氏染色│食品伙伴个性空间j~2Mx5a3KI
食品伙伴个性空间 KUVmRd h:W%H
乳糖发酵管
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│36 ±1℃ ,24±2h食品伙伴个性空间;EJ$RHv0|x

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h\%Tm5QM'HM]'tyz0│革兰氏阳性││革兰氏阴性
#r;l`3B L7n?K{0││
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6bH[R#C)V$z0││ 不产气
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b Ym|1LN`5sS_0└─┬───┘│无芽胞杆菌食品伙伴个性空间 r:jE1ka{
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┌┴───┴─┐┌────┴─┐食品伙伴个性空间/?PX(Rm[3f1h

YS!@+i3g7D1iN1R0│大肠菌群阴性│食品伙伴个性空间-iG@\V{*BR
│大肠菌群阳性││大肠菌群阴性│食品伙伴个性空间7q9\\erK/m`m(x

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so@j}8V#a R2r0└───┬──┘└────┬─┘
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└─────┘
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%E$i1}ikg07
tbl&c%o)]0操作步骤食品伙伴个性空间7l%f*n!ZB-~/l.d{h
7.1 检样稀释食品伙伴个性空间*j t l4a7q@\_xM;C
7.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌
"M7OZ,k.i H1g0玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的食品伙伴个性空间#_'Wk;^Ly t ug0j1C
均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8 000-10 000 r/min的速度处理1min,做成1:10
-K&H%r$~o)} S d0的均匀稀释液。
#GE*]`y2RT c07.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液食品伙伴个性空间Pey'R G%pQ
的试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液。
| LK qP07.1.3 另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1
VBf I X#I4y0支1mL灭菌吸管。食品伙伴个性空间 ` @S3@(D6WT ?&Q'f
7.1.4 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释食品伙伴个性空间E8~Rf_5m5U
度,接种3管。
tp4E!_3[07.2 乳糖发酵试验
;mC;ruX~2vwl0
nX*w-iz&R9T0将待检样品接种于乳糖 胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发
Gb1P;]I Fk0酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36±1℃食品伙伴个性空间+i m,~ K`^y\!|
温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如
%E7o|m"D0有产气者,则按下列程序进行。
!M[} QJ07.3 分离培养
1qE4N(Cn,?)}l0
"Ib,l3]&pPg$b0将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃ 温箱内,培养18-24h,
Ye&g$N6RS;R(~LK*zM9Q0然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。食品伙伴个性空间 H^+n*`C:I)]7g
7.4 证实试验食品伙伴个性空间 ?d9o\LxPH8P

b!W@(M sC;m$NJ mA0在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵食品伙伴个性空间{+v(lj| ~(u2z
管,置 36±1℃温箱内培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为
f+~uK1nH0阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。
9[1s[,h^07.5食品伙伴个性空间IP0Ifnd3Gj
报告
|7Xr]Q GM'Un0
:} e4A] |~j_0根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值。食品伙伴个性空间R2j+n_;wN8t xT
食品伙伴个性空间l _f Uff:~
8
+wg*j Ew*w0粪大肠菌群(faecal coliform)
y W MWL08.1 用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物(见7.2条)转 种于EC肉汤管内,
)zY)b P|2_|0置44.5±0.2℃水浴箱内(水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面),培养24±2h,经培养食品伙伴个性空间2bGf6@4tPN)i(f
后,如所有EC肉汤管均不产气,则可报告为阴性;如有产气者,则将所有产气的EC肉食品伙伴个性空间z.E,G D3M{%e;CC,`
汤管分别转种于伊红美蓝琼脂平板上,置 培养18-24h,凡平板上有典型菌落者,则证
au"Zb*SI0实为粪大肠菌群阳性。
Nv0E7L@y08.2 结果报告
?z#y9R_V#V0
k[jqB3` N0根据证实为粪大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)粪大肠菌群食品伙伴个性空间%i"ZN&tu){/IsR
的MPN值。食品伙伴个性空间-wg:s0Ga(GB

F(|'Z w(N-J0大肠菌群最可能数(MPN)检索表食品伙伴个性空间F M8vRur
┌──────────────────┬─────┬─────┐食品伙伴个性空间st5Dr,N5xYV:h tf7`

O Y i~3wcki:N0阴性管数
{R7];]$V#^%@2t+]"MDR0
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6`G&^5Q1|Dg^_0├─────┬─────┬──────┤100 mL(g) ├──┬──┤食品伙伴个性空间gF5F/rKP2{
│1mL(g),*3│0.1mL(g)*3│0.0lmL(g)*3 │食品伙伴个性空间(y.f+jYYA
│下限│上限│食品伙伴个性空间c MVxzI
├─────┼─────┼──────┼─────┼──┼──┤
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.d2E!dn8bg]_U0└─────┴─────┴──────┴─────┴──┴──┘食品伙伴个性空间Y*l;d:I.\.B7z$`'@

nA P ?"pZCx0续表
+XVA*w!bz#x,R0┌───────────────────┬────┬─────┐食品伙伴个性空间 S!q?&RgP(?R

%r/{rp(rX{0阳性管数食品伙伴个性空间)zD jS:O Z^1I cGK
│ MPN食品伙伴个性空间%[(\/oL#};n
│95%可信限│
Ni-D7n;Bc0├─────┬──────┬──────┤100mL(g)├──┬──┤
8{ WH`)l0MC%Pj0│1mL(g)×3 │0.l mL(g)x3 │0.0lmL(g)X3 │食品伙伴个性空间7_!ME eT
│下限│上限│
UO5@ Jc{"tiLGDy0├─────┼──────┼──────┼────┼──┼──┤食品伙伴个性空间#XFqv&m.r9k6S

#Vd)I*B \ ]zv00食品伙伴个性空间&Q/h9D8w)P5sAa
食品伙伴个性空间~&D8`&ku
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Su,q/["{(oQ)l d0②表内所列检样量如改用10mL(g)、1mL(g)、和0.1mL(g)时,表内数字应相应降低10倍;
He&UBu3~pR0如改用0.1mL(g)、0.01mL(g)和0.001mL(g)时,则表内数字应相应增加10倍。其食品伙伴个性空间,s N.l-?f1O\ Ae } r*B!B
余可类推。食品伙伴个性空间&b]8lb\\Yu

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本标准由卫生部卫生监督司提出。食品伙伴个性空间#a'LE|a(ycj

ZU&J vq+v:E5fK eh T0本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。
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%Z7O'pr3} a.{0本标准主要起草人刘宏道。食品伙伴个性空间:JeVw!PMq

"YM8Nl*aGv0本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。食品伙伴个性空间8QF;u-u$b8q!|
----------------------------------------------------------------------------
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8^gMW4i y9?z0中华人民共和国卫生部1994-03-18批准
"@(r]sfIew#T01994-09-01实施

DSu`i:N6q0食品伙伴个性空间:J0H4d7x7xfP

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引用 删除 Guest   /   2009-04-21 14:40:12
变色不产气呢怎么判定
 

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