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• PCR污染与对策

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: PCR 对策 污染

    PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生. 污染原因 　　(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，由于吸样... ...全文

• PCR常见问题解决

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: PCR 问题解决

  PCR常见问题解决：一般问题：9.1 过多的DNA（每个反应超过200ng）可能会产生非特异性的PCR产物。一些分子量比较大的 DNA 出现在扩增产物的电泳图上，表明可能是用的DNA太多了。弱的扩增结果表明DNA 用少了（少于75ng）,可能会出现假阴性。9.2 在分光光度计测DNA浓度的时候，RNA污染会使DNA浓度偏高。校正方法是，走一块0... ...全文

• PCR常见问题总汇

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: PCR

    PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂... ...全文

• 实验室常用溶液配制(希望对大家有帮助)

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: 配制 实验室 溶液

    一. 常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.... ...全文

• 实验室常用贮存液的配制参数2

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: 参数 配制 实验室 贮存

    四、常用抗生素溶液抗生素 贮存液a 工作浓度浓度 保存条件 严紧型质粒 松弛型质粒氨苄青霉素 50mg/ml(溶于水) -20℃ 20μg/ml 60μg/ml羧苄青霉素 50mg/ml(溶于水) -20℃ 20μg/ml 60μg/ml氯霉素 34mg/ml(溶于乙醇) -20℃ 25μg/ml 170μg/ml卡那霉素 10mg/ml(溶于水) -20℃ 10μg/ml 50μg/ml链霉素 10mg/ml(溶... ...全文

• 实验室常用贮存液的配制参数1

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: 参数 配制 实验室 贮存

    一、核酸及蛋白质常用数据化合物 分子量 λmax(pH7.0) 1摩尔溶液（pH7.0）中λmax时的最大吸收值 OD280/OD260 ATP 507 259 15400 0.15CTP 483 271 9000 0.97GTP 523 253 13700 0.66UTP 484 262 10000 0.38dATP 494 259 15200 0.15dCTP 467 271 9300 0.98dGTP 507 253 13700 0.66dTTP 482 267 9600 0.712．常用核... ...全文

• 部分实验室常识

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: 常识 实验室

    1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase的活性。2.如何将不同构型... ...全文

• 酶切反应建议

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: 建议 酶切

    一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则，即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常，一个50μl的反应体系中，1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶，则可相应缩短反应时间；如果减少酶的用量，对许多酶来说，相... ...全文

• 限制性内切酶3

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: 限制性内切酶

    3．反应时间    反应时间通常为 1 小时或更多，许多酶延长反应时间可减少酶的用量。 EcoRⅠ 若反应 16 小时，所需酶量为正常酶切时间的 1/8 ，即若反应时间为 16 小时，则所用酶量为只切 1 小时的 1/8 。其它一些酶也有类似情况，如HindⅢ为1/8；KpnⅠ为1/4；BamHⅠ为1/2。4．终止酶切的方法&nbs... ...全文

• 限制性内切酶2

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: 限制性内切酶

    4．同裂酶（isoschizomer）    识别相同序列的限制酶称同裂酶，但它们的切割位点可能不同。具体可分为以下几种情况。    ① 同序同切酶   这些酶识别序列和切割位置都相同，如 HindⅡ 与 HincⅡ 识别切割位点为 GTY↓RAC ， HpaⅡ 与 HapⅡ 识别切割位点为 C... ...全文

• 限制性内切酶1

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: 限制性内切酶

    一、限制与修饰（Restriction and modification）1．限制与修饰现象    早在 50 年代初，有许多学者发现了限制与修饰现象，当时称作寄主控制的专一性（host controlled specificity）。 l 噬菌体表现的现象便具有代表性和普遍性，其在不同宿主中的转染频率可说明这一问题（表 2-1）。 l 在感染某... ...全文

• 基因组DNA的提取

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: DNA 基因组

  第一节 概 述 　　基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。加入一定量的异丙醇或乙醇，基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出，而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而... ...全文

• 生命科学实验方法网址

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: 实验 网址 生命科学

  http://www.bioon.com/experiment/ 是目前最全的实验方法的站点，有许多实验中的疑难问题的解决方法。     http://www.bioon.com/biotech.htm 收集了最经典的protocol网站，大家多留心点！Such as:   (1)iprotocol：http://iprotocol.mit.edu/ 有近三百种方法，涉及Animal Studies、Biochemistry... ...全文

• 核酸的纯化、浓缩2

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: 纯化 核酸 浓缩

  在微型离心管中乙醇沉淀的标准方法 (1)估计DNA溶液的体积。 (2)调整单价阳离子的浓度。若DNA溶液中含有高浓度的盐，可用TE(pH8.0)稀释，否则加入表A8-1列出的一种盐。 如果DNA溶液的体积不超过400ul可在单个微型离心管中进行沉淀，体积较大时可分成数管，或者在适宜于中速离心或超离心的离心管中进行离心。 (3)充分混... ...全文

• 核酸的纯化、浓缩1

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: 核酸 纯化 浓缩

  核酸的纯化 注意：在注有<!>处材料的正确使用参见附录12。 在分子克隆的所有操作中，最基本的操作也许要算核酸的纯化了。其关键步骤是去除蛋白质，通常只要用酚：氯仿<!>和氯仿<!>抽提核酸的水溶液即可。每当在进行下一步操作之前需要把这一步克隆操作所用的酶灭活并去除时，都可采用这种抽提的方法... ...全文

• 核酸的浓缩精制

  food-110 (吉林) 发表于 2010-01-21 标签: 核酸 精制

  (adapted from Bruce A. Roe, Department of Chemistry and Biochemistry, The University of Oklahoma, Norman, Oklahoma 73019 broe@ou.edu) Typically, 2.5 - 3 volumes of an ethanol/acetate solution is added to the DNA sample in a microcentrifuge tube, which is placed in an ice-water bath for at least ... ...全文

• 乳品加工关键技术与设备

  P13764222577 (上海) 发表于 2010-01-20 标签: 关键 技术 加工 乳品 设备

    我国实施乳品加工业发展战略的重点领域是针对制约我国乳业发展的关键技术与设备，依据引进消化和自主创新相结合的原则进行科技攻关，争取在以下技术和设备上取得突破，推动我国乳品加工业的科技进步。 1．乳品加工的关键技术 (1)膜分离技术膜分离技术因其具有对环境污染小、能量消耗低、无需使用添加剂、避免... ...全文

• 辨香、评香与香精香料的挥发程度

  大豆蛋白粉 (江苏) 发表于 2010-01-19 标签: 香精香料 体香 尾香 头香 挥发 中韵 评香条

     香精香料在空气中挥发、到达鼻腔、通过神经传到大脑后使人产生嗅觉。香气根据香精香料的挥发程度可分成三段。    1. 头香或顶香 （ top note ）：最初闻到的香气叫头香。如香水瓶打开盖子时立刻闻到的那部分香气。挥发程度高，在评香条上一般认为在二小时以内挥发散尽，不留香气者为头香。... ...全文

• 香精的基本组成

  大豆蛋白粉 (江苏) 发表于 2010-01-19 标签: 香精 主剂 调和剂 矫香剂 定香剂

  香精基本上由四部分香料组成的。    1.香基或主剂，也叫基调剂（ base ）：决定香精香气的类型，是赋予特征香气绝对必要的成分，它的气味形成了香精香气的主体和轮廓。它是一种混合香料，但不做为直接加香使用，而是作为香精中的一种香料来使用，具有一定的香气特征，代表某种香型。    &nb... ...全文

• 调香的基本任务、原理和目的

  大豆蛋白粉 (江苏) 发表于 2010-01-19 标签: 商务 任务 尾香 头香 原理 原料 调香 目的 辨香

      目前调香技术分为两大类。一是日用化学品方面的调香术（Perfumery ），另一类是食品方面的调香术（ Flavouring Technology ）。本书着重介绍食品香精香料方面的基本知识、食品调香术的基本知识及结合食品生产工艺讲授食品加香的基本技术。为使初学者了解香精香料的全貌，简单介绍一些有关化妆品方面的... ...全文