色素稳定性的研究(未经许可,不得转载)[汇总在第8页92-95楼]
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色素稳定性的研究(未经许可,不得转载)[汇总在第8页92-95楼]
二.李子皮中红色素的提取及稳定性研究
李子(Plum),又名李实、嘉庆子,为蔷薇科植物。其果肉中含有多种氨基酸,果实、根皮、树脂、叶、种子亦可药用,具有清肝、涤热、生津、利水等功效。按果皮颜色可分为黄色至橙红色、绿色至黄色、红色至胭脂红色和红紫色4个品种群。红紫色的黑宝石李子在美国10个主栽李子品种中居于首位,由于其个大、色艳、味甜、耐贮、抗寒、丰产,Vc含量达56.2mg/kg,总糖含量达94.0mg/kg[3],属综合性状俱优的晚熟李子品种。从1996年引入我国以来,已在山东、河北、辽宁、陕南等地大面积推广种植,显示出巨大的潜在经济价值。但迄今为止,对其培育、推广种植的研究报道较多,对其深加工的研究报道还不多见。由紫外可见光谱及理化性质检验,可以初步推断该色素为花青类物质,属多酚类衍生物[5~7],但其主要成分及其结构尚需进一步研究确定。李皮红色素属李子深加工的副产品,其水溶性好、含量高、稳定性好、无毒,兼有营养、药理、着色等多种功能,便于提取,工艺简单,适宜于在酸性或弱酸性介质中使用,也可作为酸碱指示剂,是一种较为理想的天然食用色素,具有重要的开发价值。本研究以饮料加工厂废弃的黑宝石李子皮渣为原料提取红色素,并对其提取工艺条件和色素的稳定性进行了研究,旨在为开发和应用天然食用色素以及李子的综合利用提供依据。
1 材料与方法
1.1 试剂及仪器
体积分数95%乙醇、体积分数50%乙醇、丙酮、乙醚、石油醚、蔗糖、柠檬酸、食用香精、苯甲酸、过氧化氢,亚硫酸钠等均为国产分析纯。722型分光光度计,上海精密仪器有限公司;HS-2A型精密酸度计,上海雷磁仪器厂;恒温水浴槽,重庆仪器厂;HC-TP11-2架盘药物天平,上海第二天平仪器厂;ZFQ-85A旋转蒸发器,上海医械专机厂。
1.2 原料及其处理
将黑紫色李子皮渣(饮料厂提供)晾干,磨碎,过0.149mm(100目)筛备用。李子皮色素提取工艺流程:李子皮粉末→浸取→抽滤→滤液→减压浓缩→粗色素→精制纯化→成品(紫红色粉末状)
1.3 溶剂筛选
称取6份各0.15g李子皮粉末,分别以30mL水、体积分数95%乙醇、体积分数50%乙醇、丙酮、乙醚、石油醚等为溶剂,在室温下浸提1h,过滤、定容。
1.4 提取条件选择
1.4.1 提取剂浓度
称取4份各0.10g李子皮粉末,分别加入体积分数为30%,50%,70%,90%的乙醇溶液30mL,浸泡1h后,过滤、稀释定容至100mL,测定溶液最大吸收波长(λmax)处的吸光度值3次。同法做平行试验3次,取其平均值。
1.4.2 pH
吸取4份各30mLpH分别为1,2,4,6的体积分数50%乙醇液,分别浸提0.10g李子皮1h后过滤,用体积分数2%盐酸将滤液均调至pH为4.0,定容,测λmax处吸光度,测定方法同1.4.1。
1.4.3 浸提温度
称取4份各0.20g李子皮粉末,分别加入50mLpH为4的体积分数50%乙醇溶液定容后,在20,40,60,80℃时提取30min后,过滤定容,测λmax处吸光度,测定方法同1.4.1。
1.4.4 提取时间
称取4份各0.10g李子皮粉末,分别加入30mLpH为4的体积分数50%乙醇,室温下定容,搅拌提取0.5,1.0,1.5,2.0,3.0h后测λmax处吸光度,测定方法同1.4.1。
1.5 色素的稳定性研究
1.5.1 pH
取3份各10mL李子皮色素提取液,1份用体积分数2%的HCl调成不同pH值的酸性溶液,1份用体积分数2%的NaOH调成不同pH值的碱性溶液,另1份作酸碱可逆调节,目测色素颜色随不同pH的变化,并测定pH为2,4,6时色素溶液在可见光区的吸光度。
1.5.2 添加剂
配制含0,5,10,20g/kg蔗糖、柠檬酸、食用香精和苯甲酸的色素提取液,定容放置1h后,测定520nm处的吸光度。测定方法同1.4.1。
1.5.3 耐氧化、耐还原性
配制含0.00,0.02,0.40,0.60g/kg过氧化氢和亚硫酸钠的色素溶液,室温下静置1h,测520nm处的吸光度,测定方法同1.4.1。
1.5.4 耐热、耐光性
取色素提取液30mL,稀释至50mL置于带塞试管中定容,放在室内光照处,0,1,2,3,5,7d后测定λmax处的吸光度。同法,取色素提取液,在20,40,60,80℃放置0.0,0.5,1.0h后,冷却测λmax处的吸光度,测定方法同1.4.1。
2 结果与分析
2.1 提取溶剂的筛选
目测结果表明,色素在石油醚中几乎不溶解,在乙醚、乙酸乙酯中溶解很少,在水、体积分数95%乙醇、体积分数50%乙醇、丙酮中溶解较好,但丙酮提取液稍有浑浊,不便于研究,同时考虑到价格和食用性,选用水和乙醇为提取剂较适宜。测定提取液在400~600nm时的吸光度,结果如图1所示。
由图1可见,体积分数50%乙醇的提取效果最好,最大吸收峰波长λmax=520nm。
2.2 最佳提取条件的选择
2.2.1 提取剂
表1结果表明,乙醇体积分数为50%时提取效果最好。
2.2.2 提取剂pH值
由表2可见,提取剂pH对色素提取率的影响较大,色素提取率随提取剂pH的减小而增大,所以在酸性条件下即pH≤4时提取效果最佳。
2.2.3 浸提温度
由表3可见,随浸提温度的升高,色素提取率增加,但变化比较缓慢,出于工业化生产和节能的考虑,选择在室温(20~25℃)时提取较为合理。
2.2.4 提取时间
表4结果表明,色素提取率随提取时间的延长而增加,但2h后增加缓慢,故确定合理的浸提时间为1.5~2h。
2.2.5 L9(33)正交试验
由以上单因素试验可见,李子皮浸提液pH值、浸提液体积分数、浸提时间对提取率均有显著影响,因此,以浸提液体积分数(A)、浸提时间(B)、浸提液pH值(C)3因素设计正交试验,测定λmax处的吸光度,测定方法同1.4.1。正交试验结果如表5所示。
从极差分析(表5)可知,RC>RB>RA,故影响提取率的因素次序为C>B>A,较优提取条件是A2B3C2,即提取剂乙醇的体积分数为50%,提取剂pH为2,提取时间为2h。
2.3 李子皮红色素稳定性研究
2.3.1 pH值对色调的影响
由表6和图2可见,pH值对李子皮红色素的颜色影响很大,当pH≤4.5时为稳定的深红色,吸收曲线的最大吸收峰波长为520nm,酸性越强,色素越红;pH>5时为兰紫色,吸收曲线的最大吸收峰波长580nm,吸收曲线有较大变化,碱性越强颜色越深;而当pH约为4.8时呈无色,此时有1个颜色变化的突点,非常敏锐。整个色素的颜色改变具有可逆性,可通过pH值进行调节。
2.3.2 常见食品添加剂对色素稳定性的影响
由表7可见,蔗糖、香精、苯甲酸≤5g/kg时,对色素稳定性影响不大,柠檬酸具有一定的增色作用。
2.3.3 色素的耐氧化、耐还原性
由表8可见,色素有一定的抗氧化性,但抗还原性较差。
2.3.4 色素的耐热、耐光性
由表9,10可见,李子皮红色素不仅耐光性强,而且光照还可增色;耐热性也较好。
3 结 论
1)本研究结果表明,体积分数50%乙醇水溶液是提取李子皮红色素的最适溶剂。
2)乙醇提取李子皮红色素的最佳工艺条件:提取剂乙醇体积分数为50%,pH=2,室温(20~25℃)提取2h,抽滤,减压浓缩,真空干燥,得黑紫色粉末状色素粗品。
3)李子皮红色素是一种较为理想的无毒天然植物源指示剂。pH值对色素溶液色调影响较大,pH≤4.5为稳定的深红色,>5为兰紫色,pH在4.8左右为无色,此处有1个变化突点。
4)常用食品添加剂蔗糖、香精、苯甲酸的质量分数≤5g/kg时,对李子皮红色素几乎无影响,柠檬酸可增色,李子皮中的红色素耐光性较强,具有一定的抗氧化和耐高温能力,但抗还原性较差。
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三.南瓜黄色素的稳定性研究
天然食用色素安全无毒,色泽诱人,并且具有一定的营养价值,代替合成色素已是大势所趋。近年来对天然色素的研究报道较多,但从南瓜中提取色素的系统研究在国内未见报道。为此我们对南瓜色素的提取及其性质做了系统研究,本文就提取及其理化性质进行了研究,为开发和综合利用提供科学依据。南瓜属葫芦科,一年生蔓性草本植物,学名CucurbitamoschataDuch,别名中国南瓜、番瓜等。由于其根系发达,再生力强,对土壤湿度要求不严,其果实、种子中不仅含有丰富的营养成份,而且具有一定的药理作用,所以在全国各地普遍裁培种植。近年来有资料报道,南瓜中含锌较高,具有防治溃疡、糖尿病、心血管疾病以及防癌、抗癌等作用。特别是陕北南瓜,生长抗旱力强,果实个大,产量高。嫩果或成熟果均可作菜,作馅料,也可加工成各种成品,煮汤不仅甜美可口,而且降温败火,是夏天上等的天然饮料食品。老南瓜色泽橙红,资料表明其色素中的主要成份是胡萝卜素、叶黄素、蕃茄红素等,是一种安全、无毒,且营养价值很高的天然植物色素,具有保健和多种药理作用。
1 材料与方法
1.1 实验材料
722型可见分光光度计,上海精密仪器有限公司生产;pHS-25型酸度计;恒温水浴槽;95%乙醇;柠檬酸;蔗糖;维生素C;苯甲酸钠Na2SO3;H2O2(以上均为分析纯);食品香精;南瓜来源于榆林当地农产品市场。
1.2 实验方法
1.2.1 南瓜黄色素的提取
称取一定量的老南瓜洗净搅碎,加入7倍量(质量/体积),95%乙醇(pH=2),在60℃下搅拌提取30min,过滤得色素提取液,再次浸提滤渣次,合并3次提取液浓缩,得橙黄色粘稠状产品贮存于棕色瓶中待用。色素溶液的浓度用吸光度表示。
1.2.2 色素稳定性试验配制pH=6的浓度为0.5%的南瓜色素溶液,加入不同浓度添加剂,在722型可见分光光度计上测定最大吸收波长下的吸光度(A),分析不同浓度的添加物以及温度、光照对南瓜黄色素稳定性的影响。
2 结果与分析
2.1 南瓜色素的光谱特性配制
浓度为0.02%的色素溶液,并用722型可见分光光度计测定在400~700nm波长范围的A值,结果列入表1。由表1可知,该色素在可见光区内最大吸收波长为460nm,从外观看,色素提取稀释液为橙黄色。
2.2 色素颜色与酸度的关系
配制0.05%色素提取液用1∶1HCl和10%NaOH溶液调节酸碱度,用酸度计测定pH值,观察颜色随色素溶液pH的变化,实验结果列入表2,放置2d后目测颜色无变化。
由表2可知,南瓜黄色素在pH<9时比较稳定,颜色几乎无变化,pH>11有少量沉淀生成。2.3 常用食品添加剂对色素稳定性的影响
取含不同下列浓度蔗糖、食用香精、柠檬酸、维生素C、苯甲酸钠的溶液100mL置入1~4号锥形瓶中,分别加入10mL,7mL,7mL,7mL0.5%色素提取液摇匀,在常温下静置1h,测最大吸收波长的A,实验测定结果列入表3~表7。
由以上结果可知,这些常用的食品添加剂在使用范围内对南瓜色素溶液的A基本上没有影响。不同浓度的蔗糖、食用香精、柠檬酸、维生素C、苯甲酸钠对南瓜色素溶液的A影响结果列入表8。
香精对南瓜色素溶液A的影响,在香精浓度为0.05~0.20mg/mL之间,满足下列关系式: A=0.363-0.2w香精(1)
式(1)线性相关系数R=-0.9091。
2.4 色素的耐氧化还原性
配制分别含有下列不同浓度H2O2和Na2SO3的南瓜色素稀释液,在不同时间间隔下测定最大吸收波长的A。实验结果列入表9和表11。根据表9实验结果,关于Na2SO3对于南瓜色素溶液A的影响可拟合出如下关系式:
A=a-b
式(2)中a、b以及线性相关系数R随还原时间而变,具体变化见表10。从表10可看出,Na2SO3的存在对南瓜色素溶液的A有影响,但影响不大。
表11结果表明,H2O2对南瓜色素几乎无影响,表明南瓜色素具有较强的抗氧化性;而表10则表明具有一定的抗还原性。
2.5 色素的耐光、耐热性
取pH=6,浓度为0.5%的色素提取液15mL,10mL,分别加入至2支具塞试管中稀释定溶至100mL,一支放在室内日光照射处,定时测定A,测定结果见表10,另一支在不同温度下,恒温1h,冷却后测定A,结果见表12。实验结果表明,日照7d,A增加18.85%;日照15d,A增加仅仅为19.06%,可见日照7d之后,A增加十分缓慢,基本趋于稳定。
温度对南瓜色素溶液A的影响结果列入表13。实验结果表明,升高温度,A值减小,当T≥97℃时,南瓜色素溶液出现混浊现象。当T=25~80℃时,A与T的关系可表示为: A=0.368-5.77×10-4T(3)
式(3)的线性相关系数R=-0.9881。
由以上结果表明南瓜黄色素随光照时间延长,A有所增加,目测结果可见颜色稍有加深,说明光照可增色,但不宜高温下长时加热。
2.6 金属离子对色素稳定性的影响
配制含下列离子不同浓度的溶液,各取100mL,分别加入10mL0.5%色素提取液摇匀,放置3h后测定最大吸收峰波长处的A,结果列入表14。
实验结果表明,当离子浓度小于0.1mg/mL时对色素影响不大,当离子浓度为0.2mg/mL时Ca2+,Fe3+可使色素有少量沉淀,在酸性条件下,此沉淀可溶解。所以该色素的使用对水质无特殊要求,如在含钙高的食品中使用,酸性条件较为适宜。
3 结论
(1)南瓜黄色素,耐光性强,具有较强的抗氧化性,常用食品添加剂蔗糖,柠檬酸,香精,防腐剂苯甲酸钠,维生素C等对南瓜黄色素几乎没有影响,在酸性或弱碱性介质中颜色无变化,因此它是一种性质稳定,应用范围广的理想天然色素。但不宜在高温下常时加热。
(2)此色素对水质无要求,适用于含钙高的酸性食品或饮料。
(3)研究结果表明提取南瓜黄色素最佳条件是:pH=2的95%乙醇,45℃下浸提3h,二次提取。(4)南瓜资源丰富,易于贮存,价格低廉,其色素色泽自然,味道香甜,兼有营养、药理、着色多重功能。因此南瓜黄色素作为一种天然色素,色泽亮丽,安全性高,稳定性好,来源丰富,提取方法简单,是一种较为理想的天然食用色素,具有较大的实用开发价值。
附图表
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