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《饮用天然矿泉水国家标准GB8538》检验系列培养基

上一篇 / 下一篇  2009-08-21 09:35:22 / 个人分类:培养基

电话:13788991907    E-mail:电话@163.com提供

027160     卵黄琼脂培养基基础    (Egg Yolk Agar Base)     250g       
用    途:用于厌氧梭状芽孢杆菌的分离培养和卵磷脂酶试验(GB/T 8538-2008,GB/T4789.28-2003中4.68,GB/T4789.12-2003,GB/T4789.13-2003)。
原    理:蛋白胨和牛肉膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供能源;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;产气荚膜梭菌具有卵磷脂酶分解卵磷脂生成不溶性甘油酯形成乳白色的混浊带。
配方(每升):
牛肉膏粉 5g
蛋白胨    15g
氯化钠     5g
葡萄糖    10g
琼  脂      15g
最终pH   7.5±0.2
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使用方法:
1.称取本品50g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃灭菌15min,冷至50℃左右,每100mL培养基加入50%的无菌卵黄盐水悬液10—15mL,摇 匀立即倾注平皿,凝固后备用。卵黄乳液:用硬刷刷洗鲜蛋,沥干,放70%乙醇中浸泡1h。以无菌操作取出蛋黄,加等体积无菌0.85%氯化钠溶液,混合置 4℃贮存。
2.取待检菌的新鲜培养物划线接种或点种于卵黄琼脂平板上,于36±1℃厌氧培养24h。
3.观察接种点的变化。产气荚膜梭菌产生卵磷脂酶,分解卵黄中的卵磷脂,接种点的底部及周围形成乳白色的混浊带。
贮    存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
质控菌株接种至卵黄琼脂平板上于36±1℃培养24h结果如下:
菌    名      菌    号    生长状况             培养特征
产气荚膜梭菌     HK9051      良好    菌落周围及底部形成乳白色的混浊带

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022270    动力—硝酸盐培养基(A法)      250g    
——     用于鉴别细菌动力和硝酸盐还原试验(GB/T 8538-2008,GB/T4789.28-2003中4.72 ,GB/T4789.14-2003,GB/T4789.13-2003)。    
 

028030    液体硫乙醇酸盐培养基(FT)(需气菌、厌气菌培养基)     250g    
(Fluid Thioglycollate Medium)    ——     用于培养需氧菌、微需氧菌和厌氧菌,还用于药品生物制品的无菌试验,及食品中产气荚膜羧菌的厌氧培养(GB/T 8538-2008,GB/T4789.28-2003中4.70,GB/T4789.13-2003,SN0177-92)。
用    途:用于培养需氧菌、微需氧菌和厌氧菌,还用于药品生物制品的无菌试验,及食品中产气荚膜羧菌的厌氧培养(GB/T 8538-2008,GB/T4789.28-2003中4.70,GB/T4789.13-2003,SN0177-92)。
原    理:
胰酪胨和酵母膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供可发酵有糖类更利于生长;氯化钠维持均衡的渗透压;硫乙醇酸钠和L—胱氨酸能有效降低氧化还原 电位,防止过氧化物的积累对某些菌产生毒性,同时其硫氢基团有钝化含砷、汞及其它重金属防腐剂的抑菌作用;少量琼脂的凝固作用可防止二氧化碳、氧气和还原 产物的扩散;刃天青是氧化还原指示剂,氧化状态呈粉红色,还原状态无色。

配方(每升):
胰酪胨     15g
L—胱氨酸  0.5g
葡萄糖     5g
酵母膏粉   5g
氯化钠     2.5g
硫乙醇酸钠 0.5g
刃天青     0.001g
琼脂       0.75g
最终pH     7.1±0.2

使用方法:
1、  称取本品29.3g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管,121℃高压灭菌15min。
2、  临用时如果粉红色部分超过1/3高度时,应将培养基用水浴加热至无色,冷却至45℃以下时再立即接种检品,全管呈现粉红色时,不可再用。
3、  取可疑菌落或待测供试品,接种于FT培养基中,食品于36±1℃培养18—24h,药品于30—35℃培养3—7d。
4、  观察结果。
质量控制:
下列菌株接种后于30-35℃培养18—24h,结果如下:
菌    名                       菌    号                      生长状况
金黄色葡萄球菌       ATCC6538          良好,生长于上部,10-100CFU
生孢梭菌               CMCC(B)64941     良好,生长于底部,10-100CFU
贮    存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

028035    含铁牛奶培养基        250g    
含铁牛奶培养基 (Iron Milk Medium, modified) ——     用于产气荚膜梭菌的鉴定。(GB/T 8538-2008)
原    理:产气荚膜梭菌能发酵乳糖,凝固酪蛋白并大量产气,呈“暴烈发酵”现象。
配方(每升):
全脂奶粉      199g
硫酸亚铁      1g

使用方法:
1、称取本品200g,加入50~60℃温水溶解,分装试管,每管10mL,115℃高压灭菌10min,灭菌后,快速冷却。本培养基必须新鲜配制。  
2、取生长旺盛的FT培养液1mL接种于含铁牛奶培养基,46℃水浴培养5h。
3、观察是否有“暴烈发酵”现象。
质量控制:
下列质控菌株接种后于46℃水浴培养5h结果如下:
菌    名       菌    号   培养特征   
产气荚膜梭菌  ATCC13124   暴烈发酵
大肠埃希氏菌  ATCC25922   不发酵  
贮    存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年


028031    亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)     250g    
——     用于食品和矿泉水中产气荚膜梭菌的分离培养和计数(GB/T 8538-2008,GB/T4789.28-2003中4.69,GB/T4789.13-2003)。    
 

027150    庖肉牛肉粒    ——     用于产气荚膜梭菌的鉴定。(GB/T 8538-2008) 100g    
——     加入庖肉基础,配成庖肉培养基(GB/T 8538-2008,GB/T4789.12-2003,GB/T4789.28-2003中4.67)。    

027140    庖肉培养基基础       250g    
——     用于厌氧菌的增菌培养和保存,还用于肉毒梭菌及兼性厌氧和厌氧梭状芽孢杆菌的检验(GB/T 8538-2008,GB/T4789.12-2003,GB/T4789.28-2003中4.6)。
 
022200     乳糖蛋白胨培养液     250g    
——     用于水中多管发酵法或滤膜法测定大肠菌群(GB/T5750.12-2006和GB/T8538-2008)。

022150    品红亚硫酸钠培养基(远藤琼脂培养基)电话      250g    
——     用于水中大肠菌群的分离或确证试验。 (GB/T8538-2008和GB5750.12—2006)。

022190    亮绿乳糖培养液(BGB)       250g    
——     用于多管发酵法测定饮用矿泉水中大肠菌群的确证试验(GB/T8538-2008)。

022040    乳糖胆盐发酵培养基(Lactose Bile Ferment Broth)        250g   
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用    途: 用于多管发酵法测定食品、纯净水和一次性使用卫生用品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌(GB/T 8538-2008和GB15979-2002)。
原    理:蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;猪胆盐可抑制革兰氏阳性细菌的生长;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;溴甲酚紫是pH指示剂,酸性呈黄色,碱性呈紫色。
配方(每升):
蛋白胨  20g
猪胆盐  5g
乳糖     10g
溴甲酚紫  0.01g
最终pH    7.4±0.2 
使用方法:
1、  称取本品35克(单料)或70克(双料)加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装于带有小倒管的试管中,培养基每管10mL,115℃高压灭菌15min。
2、  样品的处理及稀释。略。
3、  (1)食品:取1mL稀释液,加入到含有10mL乳糖胆盐培养基的试管中,根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选取三个合适的稀释度每个稀释度 接种三管。将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。
(2) 一次性使用卫生用品:取样液5mL接种50mL单料乳糖胆盐发酵管。
4、  将试管放入到培养箱中36±1℃培养24h。
5、  观察结果。如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则要进行分离、证实试验。
质量控制:配成的培养基呈紫色,质控菌株接种后,于36±1℃培养24h结果如下:
菌    名
菌    号 
生长状况
产酸
产气
大肠埃希氏菌
ATCC25922
良好
+
金黄色葡萄球菌
ATCC6538 
被抑制 
贮    存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。


028365    胆汁液态培养基      提供     100g    
——     用于饮用天然矿泉水中粪链球菌滤膜法的确证实验。(GB/T 8538-2008)
月示 胨和脑-心浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供能源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂;牛胆液为选择性抑制剂。
配方(每升):
幼牛脑(提取浸出粉)   200g
牛心(提取浸出粉)     250g
葡萄糖               2g
氯化钠               5g
月示 胨              10g
磷酸氢二钠        2.5g
牛胆液               40mL
最终pH             7.4±0.2
使用方法:
1、称取本品41g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管,每管5mL,121℃高压灭菌15min.
2、接种环转移一环受测菌株培养物到培养基中,于36℃±1℃下培养3d。
3、观察受测菌能否生长。
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质量控制:
下列质控菌株接种后于36℃±1℃培养24h结果如下:
菌    名           菌    号          生长状况        培养特征
粪链球菌       ATCC29212         良好         培养基浑浊
肺炎链球菌   CMCC(B)31001   受抑制       培养基澄清  
贮    存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

028361    脑—心浸萃琼脂培养基      提供  100g    
——     广泛用于霉菌、酵母、细菌的培养,包括营养要求较高的微生物的培养,特别用于矿泉水和城市供水中粪性链球菌滤膜法的确证性实验(GB/T 8538-2008和CJ/T148-2001)。

028360    脑—心浸萃液态培养基      提供   100g    
——     广泛用于霉菌、酵母、细菌的培养,包括营养要求较高的微生物的培养,特别用于饮用天然矿泉水和城市供水中粪性链球菌滤膜法的确证性实验(GB/T 8538-2008和CJ/T148-2001)。
 
028350    KF链球菌琼脂培养基       100g    
——     用于粪性链球菌滤膜法选择性培养和计数(GB/T 8538-2008和CJ/T148-2001)。
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027052    金氏B培养基           250g 
——用于铜绿假单胞菌产荧光特性的鉴定。(GB/T 8538-2008)
(King’s B Medium)
用    途:用于铜绿假单胞菌产荧光特性的鉴定。(GB/T 8538-2008)
原    理:蛋白胨提供氮源;甘油提供碳源;磷酸盐促进荧光素的产生并抑制绿脓色素的产生;硫酸镁为荧光素的产生提供必须的阳离子;琼脂是培养基的凝固剂。
 
配方(每升):
蛋白胨        20.0g
K2HPO4     1.5g
MgSO4.7H2O 1.5g
琼脂       15g
最终pH   7.2±0.2
使用方法:
1、称取本品38g,加入蒸馏水或去离子水1 L,并加入10mL甘油,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管,每管5mL,121℃高压灭菌15min,灭菌后,取出,冷却培养基,制成斜面。  
2、接种环接种受测菌株于斜面上,于36℃±1℃培养下培养24h~5d。
3、每天取出在紫外光(360±20nm)照射下检查是否产生荧光,将5d内产生荧光的菌落记录为阳性。

质量控制:
下列质控菌株接种后于36℃±1℃培养24h结果如下:
菌    名        菌    号        生长状况    培养特征
铜绿假单胞菌     ATCC9027        良好       产荧光
铜绿假单胞菌     ATCC27853    良好       产荧光
大肠埃希氏菌     ATCC25922      良好       不产荧光
金黄色葡萄球菌  ATCC25923      良好      不产荧光  
贮    存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
配套相关:  029080  甘油             1 g*10  
( 每支添加于100ml (027050)或(027051)中配成绿脓菌素测定用培养基
029229  钠氏试剂     10ml/瓶      用于绿脓杆菌分解乙酰胺产氨试验


027053    假单胞菌琼脂基础培养基/CN琼脂     250g    
——     用于铜绿假单胞菌的选择性分离和培养。(GB/T 8538-2008)
原    理:明胶胨和胰蛋白胨提供氮源;甘油提供碳源;硫酸钾和氯化镁可促进绿脓色素的产生;琼脂是培养基的凝固剂。
配方(每升):
明胶胨 16.0g
胰蛋白胨 10.0g
K2SO4   10.0g
MgCl2  1.4g
琼脂    15g
溴化十六烷基三甲胺  0.2g
最终pH  7.1±0.2

使用方法:
1、称取本品52.6g,加入蒸馏水或去离子水1 L,并加入10mL甘油(029080),搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min。  
2、待培养基冷却至45~50℃时,每100mL培养基加入CN琼脂配套试剂(SR0230)1支(1.5mg萘啶酮酸),混匀后倾注平板,培养基厚度至少高5mm;
3、待测水样过滤后,将滤膜贴在已制备好的CN琼脂平板上,平铺并避免在滤膜和培养基之间夹留着气泡,于36℃±1℃下培养40h~48d。
4、观察结果。
质量控制:
下列质控菌株接种后于36℃±1℃培养48h结果如下:
菌    名                菌    号       生长状况      培养特征
铜绿假单胞菌    ATCC9027        良好      产黄绿色色素
铜绿假单胞菌    ATCC27853    良好      产黄绿色色素
大肠埃希氏菌    ATCC25922      受抑           -
金黄色葡萄球菌  ATCC25923     受抑           -

贮   存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

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TAG: 蛋白胨 国家标准 假单胞菌 检验 矿泉水 培养基 琼脂 天然

 

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