空间管理您的位置: 食品伙伴个性空间 » 永远是新人的家 » 日志

莱因—埃农氏法测定乳糖和蔗糖含量

上一篇 / 下一篇 2007-05-19 10:00:55

查看( 994 ) / 评论( 0 ) / 评分( 0 / 0 )

1．原理

费林氏甲、乙液混合后，生成天蓝色氢氧化铜沉淀，立即与酒石酸钾钠起反应，生成深蓝色的酒石酸钾钠铜。酒石酸钾钠铜被葡萄糖和果糖还原，生成红色的氧化亚铜沉淀。达到终点时，稍微过量的转化糖将蓝色的次甲基蓝还原为无色的隐色体，而显出氧化亚铜的红色。

2．试剂

（1）乙酸铅溶液（200 g／L）。

（2）草酸钾—磷酸氢二钠溶液：取草酸钾3 g，磷酸氢二钠7 g，溶解于100mL水中。

（3）费林氏液（甲液及乙液）

碱性酒石酸铜甲液：称15 g硫酸铜（CuSO₄·5H₂0）及0.05 g次甲基蓝，溶于水中并定容至1000 mL。

碱性酒石酸铜乙液：称取50 g酒石酸钾钠及75 g氢氧化钠，溶于水中，再加入4 g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释并定容至1000 mL，储存于橡胶塞玻璃瓶中。

（4）次甲基蓝溶液（10 g／L）。

（5）盐酸溶液（1+1）。

（6）氢氧化钠溶液（300 g／L）。

（7）甲基红乙醇溶液（2 g／L）：取0.2 g甲基红，溶于100 mL乙醇溶液（1+5）中。

（8）费林氏液的标定

① 准确称取经烘干冷却后的分析纯无水葡萄糖0.5 g于烧杯中，用水溶解后移人250 mL容量瓶中，用少量水冲洗烧杯，洗液移人250mL容量瓶中，定容，摇匀备用；

② 把葡萄糖液注入50mL滴定管中，准确吸取费林氏甲、乙液各5 mL于250 mL锥形瓶中，由滴管渐渐加入糖液22 mL，置电炉上加热；

③ 沸腾后保持1 min，由滴管逐滴加糖液，待快到终点时，加入1％次甲基蓝2滴，并继续滴加糖液，直至蓝色褪尽显出鲜红色为终点；

④ 正式滴定时，先加入比预测时少0.5 mL左右的糖液，其他操作同上。

⑤ 计算

M＝mv/250

式中：

M－10 mL混合费林氏液相当于葡萄糖的质量，g；

m—葡萄糖的质量，g；

v—葡萄糖液滴定的体积数，mL；

250—葡萄糖液的体积，mL。

3．操作方法

（1）乳糖测定方法

① 样品处理

称取2.5～3 g样品（准确到0.01 g），用100 mL水分数次溶解并洗人250 mL容量瓶中，加4 mL乙酸铅、4 mL草酸钾—磷酸氢二钠溶液，每次加入试剂都要徐徐加入，并摇动容量瓶，用水稀释至刻度，摇匀。静置数min，用干燥滤纸过滤，弃去最初25 mL，所得样液作滴定用。

② 预备滴定

在50 mL滴定管中注入上述待测样液15 mL。移取费林氏甲、乙液各5 mL于250 mL锥形瓶中，置电炉上加热，使其在2 min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15 s，加入次甲基蓝液3滴，徐徐滴人样液至蓝色完全褪尽为止，读取所用样液的体积。

③ 精密滴定

吸取费林氏甲、乙液各5 mL于250 mL锥形瓶中，一次加入比预备滴定量少0.5～1.0mL的样液，置于电炉上使其在2 min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2 min，加入3滴次甲基蓝液，一滴一滴地滴入样液，待蓝色褪尽即为终点，以此滴定量作为计算的依据（在同时测定蔗糖时，此即为转化前滴定量）。

④ 结果计算：

式中：

W—样品中乳糖的质量分数，％；

V_l一滴定消耗样液量，mL；

m—样品的质量，mg；

F_l—由消耗样液的体积查表所得乳糖数，mg；

f₁—费林氏液乳糖校正值。

（2）蔗糖测定方法

① 转化前转化糖量的计算

利用测乳糖时的滴定量，自表2-1中查出相对应的转化糖量，按下式计算。

式中：

L2—转化前转化糖量，％；

F₂—由测定乳糖时消耗样液的体积查表所得转化糖的数，mg；

f₂—费林氏液蔗糖校正值；

V₁—滴定消耗样液量，mL；

m－样品的质量，mg。

溶液中乳糖、蔗糖共存时，测定乳糖时应在滴定量中加上校正数，见表2-2。

② 样液的转化及滴定

取50mL样液于100mL容量瓶中，加20mL水，再加入盐酸（体积分数50％），置75℃水浴锅中，时时摇动，在2min 30s至2min 45 s之间使瓶内升温至67℃，自达到67℃后继续在水浴中保持5 min，于此时间内使其温度升至69.5℃，取出，用凉水冷却，当瓶内温度冷却至35℃时，加甲基红指示剂2滴，用300 g／L氢氧化钠中和至呈中性，冷却至20℃，用水稀释至刻度，摇匀。在此温度下保温30 min后再滴定。