深部真菌感染检测的临床意义

近 年来，免疫缺陷患者数量不断增多，使得深部真菌感染率大大升高。对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断。传统真菌鉴定方法都因周期长、血培养率低而难 于快速诊断。研究者也逐渐将早期诊断的注意力转向建立血清学方法来检测真菌菌体成分或代谢产物，如测定白念珠菌的甘露聚糖、烯醇化酶、D-阿拉伯糖醇等。鉴于深部真菌感染时，经吞噬细胞处理，菌胞壁降解成分大量入血，90年代初，有学者建立了以检测血浆或血清中真菌胞壁成分（1→3）-β-D-葡聚糖【(1→3)-ß-D-Glucan】的含量，来早期诊断深部真菌感染，这一方法也已初步应用于动物模型和临床标本上。检测标本中（1→3）-β-D-葡聚糖含量用于早期诊断深部真菌感染，具有较好灵敏度和特异性，且迅速、简便，并能提示抗真菌药物治疗。

（1→3）-β-D-葡聚糖【(1→3)-ß-D-Glucan】的检测新方法

当外源细菌和真菌侵害昆虫时，昆虫启动其自我保护机制，由体液中的一些列因子诱发prophenoloxidase (proPO)酚氧化酶原级连反，形成黑色素。利用这个原理，WAKO创新的提取出桑蚕血清制成冻干粉SLP(Code #297-51501)，摒弃传统的从鲎变形细胞溶解物去除B因子和C因子的方法，利用其与葡聚糖或肽聚糖反应生成黑色素的原理来定量或者定性的检测(1→3)-ß-D-Glucan（葡聚糖），peptidoglycan（肽聚糖），进一步判断真菌或者细菌污染。

注：

(1→3)-ß-D-Glucan（葡聚糖）：真菌细胞壁成份

peptidoglycan（肽聚糖）：细菌细胞壁成份

SLP检测葡聚糖的原理图

 

★★ SLP Reagent Set (Code #297-51501) 细菌、真菌污染检测试剂试剂盒 肽聚糖和葡聚糖检测试剂盒 深部真菌感染检测试剂盒 ★★

1. 用于酶标仪或目测检测，可测约50次

2. 内毒素检测仪，可测约30次

3. SLP试剂复溶后应在30min内使用

4. 此试剂盒只用于研究，不用于人

原理：

当外源物质侵入昆虫机体时，形成黑色素，并把此外源物质包围，这就是昆虫的自我保护机制。黑色素形成跟一系列反应机制有关，包括多聚丝氨酸蛋白酶称为prophenoloxidase (proPO)酚氧化酶原级连反应，(proPO)级连反应可以被被肽聚糖（PG）和 (1→3)- β-D-葡聚糖（BG）激活，肽聚糖（PG）是革兰氏阳性和阴性菌的细胞壁成分， (1→3)-β-D-葡聚糖时真菌细胞壁的组成成分。家蚕体液中含有酚氧化酶原级连反应，SLP试剂来源于家蚕幼虫血浆（silkworm larvae plasma (SLP)），含有(proPO)级连反应的所有因子，SLP试剂被PG肽聚糖和glucan (BG)葡聚糖激活，用这种试剂可以检测细菌和真菌。

样品与SLP试剂混合后，样品中的PG和/或BG激活酚氧化酶原proPO级连反应，在级连反应中产生PO，其氧化SLP试剂中的底物DOPA（二羟基苯丙氨酸），形成黑色素，以此来判断样品中细菌和真菌污染。

特点：

1. 高灵敏度测定PG和BG

2. 可用目测检测，无需其他仪器

3. 用酶标仪检测，更精确更敏感

4. 利用酶标仪和内毒素检测仪，可以定量测定PG和BG

5. 可以检测微生物污染

 

相关试剂
162-18101	Peptidoglycan, from Micrococcus luteus	肽聚糖，来源滕黄微球菌	2 mL
030-09903	Curdlan【(1→3)-β-D-glucan】	热凝胶多糖【(1→3)-β-D-葡聚糖】	1g

上海西宝生物 （13817370083）提供食物纤维测定试剂盒
       本产品为基于简化Prosky法的酶试剂盒。使用本产品时无需进行酶处理时的pH调整，可以同时进行蛋白酶及淀粉葡萄糖苷酶处理。与现有的Prosky法试剂盒相比，本产品操作更加简单，同时测量精度也更高。

特点：
操作简单。            进行酶处理时不需要调整pH。

测量精度高。          酶处理时间缩短。

操作方法：

1.    将试验材料溶解于MES/Tris缓冲液中

2.    热稳定α-淀粉酶处理 (pH6.3 在95℃放置30分钟)

3.    蛋白酶、淀粉葡萄糖苷酶处理 (pH6.3 在60℃放置30分钟)

4.    加入4倍95%乙醇（约200ml）

5.    放置1小时，过滤

6.    乙醇、丙酮清洗

7.    干燥（一夜）

8.    蛋白质定量（凯氏法）及灰份定量

9.    总食物纤维

优势：
1.    无需再次调整pH浓度，酶处理时间缩短。
2.    乙醇使用量减少。



产品编号         品名                  规格        容量

291-59701    Dietary Fiber Assay Kit 食品分析用   100tests

1、食物纤维测定试剂盒
本产品为基于简化Prosky法的酶试剂盒。使用本产品时无需进行酶处理时的pH调整，可以同时进行蛋白酶及淀粉葡萄糖苷酶处理。与现有的Prosky法试剂盒相比，本产品操作更加简单，同时测量精度也更高。

特点：
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操作方法：
1.    将试验材料溶解于MES/Tris缓冲液中
2.    热稳定α-淀粉酶处理 (pH6.3 在95℃放置30分钟)
3.    蛋白酶、淀粉葡萄糖苷酶处理 (pH6.3 在60℃放置30分钟)
4.    加入4倍95%乙醇（约200ml）
5.    放置1小时，过滤
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7.    干燥（一夜）
8.    蛋白质定量（凯氏法）及灰份定量
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1.    无需再次调整pH浓度，酶处理时间缩短。
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产品编号        品名        规格        容量
291-59701        Dietary Fiber Assay Kit        食品分析用        100tests

上海西宝生物科技有限公司    杨宏伟 13817370083
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电话:021-50272975/76/77/78转6220
E-mail:yy@cxbio.com
http: www.cxbio.com——西宝生物网 （现货备有2500多种常用试剂，超过12万种产品供应


2、食品中致敏物质检测试剂盒
FASTKIT ELISA ver.Ⅱ系列   ~蛋、牛奶、小麦、荞麦、花生
特长
●高感度（测定范围: 0.78~50ng/ml）              
●可同时检出复数抗原蛋白质         
●可检测被加热加压的加工食品   
●试剂全部都是溶液型              
●分为蛋、牛奶、小麦、荞麦、花生各专用试剂盒
■食品测定操作

粉碎食品样品
↓
加入19ml检体提取液，振荡12小时以上
↓
离心分离，除去过滤出来的不溶物
↓
用稀释用缓冲液稀释20倍
↓
ELISA法操作(所需时间：约3.5小时)
↓
测定感光板读数(450nm/600-650nm)


产品编号                         品名                                     规格
304-16721        FASTKIT ELISA ver.Ⅱ蛋            96tests
301-16731        FASTKIT ELISA ver.Ⅱ牛奶        96tests
308-16741        FASTKIT ELISA ver.Ⅱ小麦        96tests
305-16751        FASTKIT ELISA ver.Ⅱ荞麦        96tests
302-16761        FASTKIT ELISA ver.Ⅱ花生        96tests