氨基酸分析方法的分类和特性比较

氨基酸分析方法的分类和特性比较

氨基酸分析是指20種蛋白水解氨基酸和40餘種游離氨基酸的分析。 氨基酸分析是指20种蛋白水解氨基酸和40余种游离氨基酸的分析。 氨基酸分析儀自1958年問世以來，經不斷改進，目前已發展成全自動化的分析儀器，成爲現代食品、飼料、生物技術、醫藥衛生和生命科學等行業常規的檢測設備。 氨基酸分析仪自1958年问世以来，经不断改进，目前已发展成全自动化的分析仪器，成为现代食品、饲料、生物技术、医药卫生和生命科学等行业常规的检测设备。

氨基酸分析儀的原理與液相層析相同.  依照分離和檢測方法的不同可分爲兩大類型。 氨基酸分析仪的原理与液相层析相同.依照分离和检测方法的不同可分为两大类型。 第一類是基於陽離子交換、分離管後ninhydrine衍生、（可見光）光度法測定的典型標準（ICE-- 離子交換層析 ）方法。 第一类是基于阳离子交换、分离管后ninhydrine衍生、（可见光）光度法测定的典型标准（ICE-- 离子交换层析 ）方法。 此類方法於1972年榮獲諾貝爾獎， 是目前在國際上的標準方法. 第二類是所有基於逆相層析分離、分離管前衍生、螢光或紫外檢測的高效液相法（HPLC）或以陰離子交換分離接安培檢測器的離子層析（IC）法。 此类方法于1972年荣获诺贝尔奖，是目前在国际上的标准方法.第二类是所有基于逆相层析分离、分离管前衍生、萤光或紫外检测的高效液相法（HPLC ）或以阴离子交换分离接安培检测器的离子层析（IC）法。 兩類方法的特性比較如下表. 两类方法的特性比较如下表.

表1： 氨基酸分析方法的分類和特性比較表 表1： 氨基酸分析方法的分类和特性比较表

方法 方法	IEC	HPLC
原理 原理	陽離子交換分離、分離管後ninhydrine衍生光度法測定 阳离子交换分离、分离管后ninhydrine衍生光度法测定	高效液相逆相層析分離、分離管前衍生、光度法測定 高效液相逆相层析分离、分离管前衍生、光度法测定					陰離子交換直接測定 阴离子交换直接测定
衍生試劑 衍生试剂	Ninhydrine	PITC	OPA	FMOC	AQC	DABS-Cl	無 无
基質干擾 基质干扰	無 无	有	有	有	有	有	有
多餘試劑 多余试剂	不干擾 不干扰	需除去 需除去	不干擾 不干扰	需除去 需除去	不干擾 不干扰	需除去 需除去	無 无
檢測器 检测器	可見光 可见光	UV	螢光 萤光	螢光 萤光	螢光 萤光	UV	安培 安培
檢測限 检测限	3-50 pmol 3-50 pmol	50pmol	1-5pmol	1pmol	3pmol	50pmol	Xpmol
優點 优点	方法成熟可靠。 方法成熟可靠。 穩定性、再現性和線性都比HPLC法好，無基質干擾，分離管使用期長，一次可分析43種 氨基酸 稳定性、再现性和线性都比HPLC法好，无基质干扰，分离管使用期长，一次可分析43种 氨基酸	儀器可一機多用，對一些 氨基酸 有很高的靈敏度，分析時間較短. 仪器可一机多用，对一些 氨基酸 有很高的灵敏度，分析时间较短.
缺點 缺点	對整機性能要求高，需要濃度和溫度雙梯度程式控制。 对整机性能要求高，需要浓度和温度双梯度程式控制。 儀器專用化. 仪器专用化.	衍生反應和産物穩定性常受基質和過量試劑干擾，方法的穩定性、再現性、線性和可靠性不如ninhydrine法。 衍生反应和产物稳定性常受基质和过量试剂干扰，方法的稳定性、再现性、线性和可靠性不如ninhydrine法。 且分離管使用期短，衍生試劑一般較貴，方法操要求高。 且分离管使用期短，衍生试剂一般较贵，方法操要求高。
應用 应用	是測定水解和游離 氨基酸的 國際標準方法及標準質量控制分析方法. 是测定水解和游离 氨基酸的 国际标准方法及标准质量控制分析方法.	對一些個別 氨基酸分析有應用價值。 对一些个别 氨基酸分析有应用价值。 作爲非標準方法亦用於肽類 、水解和游離氨基酸的分析. 作为非标准方法亦用于肽类 、水解和游离氨基酸的分析.

說明： IEC離子交換層析；PITC異硫氰酸苯酯；OPA鄰苯二甲醛；FMOC 9-芴基甲氧羰酰氯；AQC 6-氨基-喹啉基-N-羥基琥貝酰亞胺-氨基甲酸酯；DABS-Cl 二甲基氨基偶氮苯磺酰氯 说明： IEC离子交换层析；PITC异硫氰酸苯酯；OPA邻苯二甲醛；FMOC 9-芴基甲氧羰酰氯；AQC 6-氨基-喹啉基-N-羟基琥贝酰亚胺-氨基甲酸酯；DABS-Cl二甲基氨基偶氮苯磺酰氯

由表1可見，IEC法較HPLC爲優，而且儀器自動化，成爲專用 氨基酸分析 儀器。 由表1可见，IEC法较HPLC为优，而且仪器自动化，成为专用 氨基酸分析 仪器。

三種 IEC 型氨基酸分析儀主要性能和技術規格對照表三种 IEC 型氨基酸分析仪主要性能和技术规格对照表

　

國外 氨基酸分析 儀器中，基於 傳統型 I EC方法原理並按照計量法規目前已正式通過技術總局認證的，有Hitach公司的L-8800，安瑪西亞公司的30系列和AminoNova公司的A200型三種 氨基酸分析儀.. 而提供HPLC型 氨基酸分析 儀器的廠家有Waters , Angelient, Himatzu, Dionex等。 国外 氨基酸分析 仪器中，基于 传统型 I EC方法原理并按照计量法规目前已正式通过技术总局认证的，有Hitach公司的L-8800，安玛西亚公司的30系列和AminoNova公司的A200型三种 氨基酸分析仪.. 而提供HPLC型 氨基酸分析 仪器的厂家有Waters , Angelient, Himatzu, Dionex等。 但此類儀器 用做 氨基酸分析 儀器時，還須首先通過 氨基酸分析的認證。 但此类仪器 用做 氨基酸分析 仪器时，还须首先通过 氨基酸分析的认证。 上述三家IEC型儀器的性能和技術參數見表2。 上述三家IEC型仪器的性能和技术参数见表2。

表2： 三種 IEC 型氨基酸分析儀主要性能和技術參數對比一覽表 表2： 三种 IEC 型氨基酸分析仪主要性能和技术参数对比一览表

對照 对照 內容 内容	AminoNova A200	日立 日立 L-8800	安瑪西亞 安玛西亚 30系列 30系列
原理 原理	IEC型：陽離子交換分離、分離管後ninhydrine衍生、570nm/440nm光度法檢測、分析過程自動化（國際標準） IEC型：阳离子交换分离、分离管后ninhydrine衍生、570nm/440nm光度法检测、分析过程自动化（国际标准）	相同 相同	相同 相同
儀器構型 仪器构型	新型專利：整合式小型化，不須氮氣，試劑消耗爲傳統型的1/3， 新型专利：整合式小型化，不须氮气，试剂消耗为传统型的1/3， 體積65x65x90cm, 重量55kg 体积65x65x90cm,重量55kg	傳統型：非整合式，須用氮氣，，試劑消耗量多3倍, 體積900x650x1050 ,重量爲. 传统型：非整合式，须用氮气，，试剂消耗量多3倍,体积900x650x1050 ,重量为.	傳統型：非整合式，須用氮氣，試劑消耗多3倍，體積重量中等 传统型：非整合式，须用氮气，试剂消耗多3倍，体积重量中等
硬體 硬体	新型、微小化硬體 新型、微小化硬体	該公司傳統硬體 该公司传统硬体	該公司傳統硬體 该公司传统硬体
幫浦 帮浦	微小雙分離管塞幫浦：鈦合金內襯，耐壓45Mpa, 流速0.001-9.99ml/min 微小双分离管塞帮浦：钛合金内衬，耐压45Mpa,流速0.001-9.99ml/min	普通雙分離管塞幫浦：不銹鋼內襯，耐壓19.6Mpa, 0.05-0.99 ml/min 普通双分离管塞帮浦：不锈钢内衬，耐压19.6Mpa, 0.05-0.99 ml/min	普通雙分離管塞幫浦：陶瓷內襯，耐壓45Mpa, 流速130ml/hr 普通双分离管塞帮浦：陶瓷内衬，耐压45Mpa,流速130ml/hr
自動 自动 進樣器 进样器	三維傳動， 120位，內建冷卻系統 三维传动， 120位，内建冷却系统	轉盤型， 80位，須另選配製冷型 转盘型， 80位，须另选配制冷型	轉盤型，須另選配製冷型 转盘型，须另选配制冷型
分離模式 分离模式	雙梯度分離：濃度梯度+溫度梯度 双梯度分离：浓度梯度+温度梯度	濃度梯度 浓度梯度	濃度梯度 浓度梯度
分離管控溫箱 分离管控温箱	半導體裝置，精度0.01 0 C 半导体装置，精度0.01 0 C 最適宜作精密溫度梯度控制 最适宜作精密温度梯度控制	半導體裝置，精度1 0 C，等溫度分離，無溫度梯度 半导体装置，精度1 0 C，等温度分离，无温度梯度	半導體裝置，精度1 0 C，等溫度分離，無溫度梯度 半导体装置，精度1 0 C，等温度分离，无温度梯度
光度計 光度计	基於二級管技術， 570nm 440nm波長靈敏度較常規光度計高10倍以上，無需保養，使用期長. 基于二级管技术， 570nm 440nm波长灵敏度较常规光度计高10倍以上，无需保养，使用期长.	常規光柵光度計，需保養防潮，對環境敏感，使用期較短 常规光栅光度计，需保养防潮，对环境敏感，使用期较短	常規光柵光度計，需保養防潮，對環境敏感，使用期較短 常规光栅光度计，需保养防潮，对环境敏感，使用期较短
分析分離管和分析方法 分析分离管和分析方法	鋰鹽方法（ 7μ鋰鹽分離管4.6x100mm） 锂盐方法（ 7μ锂盐分离管4.6x100mm） 能兼作水解氨基酸和游離氨基酸，無需更換分析體系。 能兼作水解氨基酸和游离氨基酸，无需更换分析体系。 鈉鹽方法（ 7μ鈉鹽分離管4.6x100mm） 钠盐方法（ 7μ钠盐分离管4.6x100mm） 能作21種水解氨基酸 能作21种水解氨基酸	傳統的鋰鹽方法只能作游離氨基酸，不能作水解氨基酸。 传统的锂盐方法只能作游离氨基酸，不能作水解氨基酸。 傳統的鈉鹽方法 传统的钠盐方法 （ 3μ鈉鹽分離管4.6x60mm）能作18種水解氨基酸 （ 3μ钠盐分离管4.6x60mm）能作18种水解氨基酸	傳統的鋰鹽方法只能作游離氨基酸，不能作水解氨基酸。 传统的锂盐方法只能作游离氨基酸，不能作水解氨基酸。 傳統的鈉鹽方法 传统的钠盐方法 （ 8μ鈉鹽分離管4.6x200mm）能作18種水解氨基酸 （ 8μ钠盐分离管4.6x200mm）能作18种水解氨基酸
控制軟體 控制软体	新型控制軟體aminoControl控制包括溫度梯度、濃度梯度等全部參數，符合GLP規範，具遠端診斷功能，每分鐘自動記錄儀器狀態和參數，直覺的圖型化介面. 新型控制软体aminoControl控制包括温度梯度、浓度梯度等全部参数，符合GLP规范，具远端诊断功能，每分钟自动记录仪器状态和参数，直觉的图型化介面.	一般控制軟體 一般控制软体	一般控制軟體 一般控制软体
資料處理軟體 资料处理软体	氨基酸分析專用軟體aminoPeak 氨基酸分析专用软体aminoPeak 除一般功能外還增設如氨基酸詞庫、雙通道合併、新穎的譜圖識別和統計功能等功能。 除一般功能外还增设如氨基酸词库、双通道合并、新颖的谱图识别和统计功能等功能。 具中、英文雙版本 具中、英文双版本	一般分析軟體，英文版本 一般分析软体，英文版本	一般分析軟體，英文版本 一般分析软体，英文版本
保留時間重現性 保留时间重现性	小體積進樣（ 2-4nmol）精氨酸0.03%, 21種氨基酸全部CV≤0.1% . 小体积进样（ 2-4nmol）精氨酸0.03%, 21种氨基酸全部CV≤0.1% .	大體積進樣（ 10nmol）精氨酸0.3% （廠家樣本） 大体积进样（ 10nmol）精氨酸0.3% （厂家样本）	大體積進樣（ 10nmol）精氨酸0.5%, 大体积进样（ 10nmol）精氨酸0.5%,
峰面積重現性 峰面积重现性	小體積進樣（ 2-4nmol）甘氨酸0.5%, 組氨酸0.3%，21種氨基酸全部CV≤0.8%. 小体积进样（ 2-4nmol）甘氨酸0.5%,组氨酸0.3%，21种氨基酸全部CV≤0.8%.	大體積進樣（ 10nmol）甘氨酸1%, 組氨酸1% 大体积进样（ 10nmol）甘氨酸1%,组氨酸1%	大體積進樣（ 10nmol）甘氨酸1.5%, 組氨酸1.5% 大体积进样（ 10nmol）甘氨酸1.5%,组氨酸1.5%
分離度 分离度	蘇氨酸/絲氨酸：100% 苏氨酸/丝氨酸：100% 甘氨酸/丙氨酸：93% 甘氨酸/丙氨酸：93% 21種氨基酸平均≥98% 21种氨基酸平均≥98%	蘇氨酸/絲氨酸：90% 苏氨酸/丝氨酸：90% 甘氨酸/丙氨酸：90% 甘氨酸/丙氨酸：90%	蘇/絲：85% 苏/丝：85% 甘/丙：85% 甘/丙：85%
檢測極限, S/N 检测极限, S/N	組氨酸1pmol, 天冬氨酸3pmol 组氨酸1pmol,天冬氨酸3pmol 21種氨基酸平均3pmol 21种氨基酸平均3pmol	天冬氨酸3pmol 天冬氨酸3pmol	組氨酸9pmol, 组氨酸9pmol,
儀器線性 仪器线性	甘氨酸r= 0.9999 甘氨酸r= 0.9999 組氨酸r= 1.0000 组氨酸r= 1.0000	無 无	甘氨酸r= 0.99 甘氨酸r= 0.99 組氨酸r= 0.99 组氨酸r= 0.99
分析時間 分析时间	分析21種氨基酸ca. 45min 分析21种氨基酸ca. 45min 分析43種氨基酸ca. 75min 分析43种氨基酸ca. 75min	分析18種氨基酸30min, 完全分離80 min，分析43種氨基酸ca. 110min 分析18种氨基酸30min,完全分离80 min，分析43种氨基酸ca. 110min	分析18種氨基酸40min, 完全分離80 min，分析43種氨基酸ca. 120min 分析18种氨基酸40min,完全分离80 min，分析43种氨基酸ca. 120min
試劑方案 试剂方案	4種方案 4种方案 1）   提供原裝成品試劑. 1） 提供原装成品试剂. 2）   提供濃縮液供用戶自行稀釋. 2） 提供浓缩液供用户自行稀释. 3）   提供配方，協助實現試劑本土化 3） 提供配方，协助实现试剂本土化 4）協助用戶購買必要的進口固體試劑，幫助自配試劑. 4）协助用户购买必要的进口固体试剂，帮助自配试剂.	提供配方供用戶自行配製，或購買原裝試劑. 提供配方供用户自行配制，或购买原装试剂.	用戶購買原裝試劑. 用户购买原装试剂.
售後服務 售后服务	2年免費保修，永久性維護 2年免费保修，永久性维护	1年免費保修 1年免费保修	1年免費保修 1年免费保修